29
. ., . , , . , , .li 1957 . . . . , , , , (.29.1).
.29.1. : ) ; ) ; )
:
1) , , -, ;
2) (dNTP). . , 3´-, 5´→3´ ( , ). , , . ;
3) , : -, (), , , ssb-. , 20 , - , .
- - , . - : Pol I, Pol II Pol III. Pol I Pol III. - I (3ʹ→5ʹ, 5ʹ→3ʹ)- , , , , , . E.coli 400 . Pol III .
, , - III (Pol III). 3ʹ→5ʹ- ; , . 10-20 Pol III, . - .29.2.
|
|
. 29.2. - III
- (αθε), β- , τ- -. γ- (γ,δ,δ´,χ,ψ) - , -.
- -, , : R- , , ʹ- :
, - III () . - (), 3ʹ--.
. , . : I , , . II , , . .
( . helix - , dnaB), . , . ssb -, .
. -. - (. 29.3), dnaG .
29.3 , :
■ N- (110 ), - - ;
■ () (322 ) ;
■ - (151 ), dnaB.
. 29.3. E.coli
, E.coli, pppAG 5´- 10-12 . , .
- , 5ʹ-- 3ʹ-- . , .
29.1 , .
29.1
,
, | |
- | |
- | |
ssb | |
- |
: , .
|
|
, oriC, (terminus). , , . . .
dnaA oriC, . - oriC, (dnaB), dnaC (.29.4).
.29.4.
dnaB dnaC, 5ʹ→3ʹ dnaG. - - .
, . dnaB , , (.29.5).
) )
. 29.5. (); Pol III
, . Dna Dna, , .
- (.29.5) (.29.6).
.29.6. E.coli
. , , - III, . - (), , , .
, . , . , , (.29.7).
, , . - (), -. - III 1000-2000 .
.29.7.
, ol III, :
1) - . Pol I, 5ʹ→3ʹ- ;
2) , . - I, 3ʹ-- (.29.8);
3) -;
|
|
4) , 3ʹ→5ʹ- , Pol III, Pol I.
.29.8. - I
, , , (.29.9).
.29.9.
. , .
, .. . - III . - , . - , , G . , - , ( ) , ( ). 500 , , , 50 .
, , . , , (), , . . 1000, - 5-20 . . . -. - (a δ); β- ε- , γ- . , - . (.29.10).
. 29.10.
, , , -, :
( , .) , , , . , .
, , :
1) ( , ; ; , .);
|
|
2) , , ;
3) ;
4) , , , .
. 29.11 ..
.29.11.
. , , . , , . , , , , , .
, , -, (. 29.12).
.29.12.
. . , , . (, ) . - I ( ) - δ ( ). , , . -. . .
30
( )
. , . , , , , , . .
, , , , .
- -, , -, , -5ʹ-. - Mg2+. -, - -5ʹ- (, GTP, CTP, UTP). , - . ; .
5ʹ→ 3ʹ. , -5ʹ- 3ʹ- . , -.
; , . , . , - , -. . (), . , () U ().
, :
( ) | TACGGATA |
ATGCCTAT |
, :
UACGGAUA | |
, .
. . .
|
|
-, , ‒ . , ( ), ‒ ( ). . , , , , (). , .
- ‒ , . .li 5 : 2 α-, β-, βʹ-, σ- ω-. , σ-, - -. , , . - σ- (.30.1).
, . ( 5-10) σ- , -.
. 30.1.
, : , .
, () . , .
‒ , 40 . . ( ) 10 (+1); ‒10-, -, ( ). - . 35 (-35) - (.30.2).
.30.2.
- , (.30.3), . -.
. 30.3.
, (+)- , 5ʹ→ 3ʹ. ‒ GTP, . 5ʹ,3ʹ- . σ- , - .
. , . -, , , , , . (.30.4).
5ʹ- 3ʹ- (‒)-, 3ʹ→5ʹ, .. . 3ʹ-. - . , -, 150 Ǻ. - − 150×115×110Ǻ.
. 30.4.
- 50 . - . - . , 3′- . 9 . 12 .
- . , 10 . , . , - , 1000 . 100000 . , , , .
, .. (.30.5). 50 . ( ). - (-) , σ-. - .
.30.5.
, , . (GC- ), 3ʹ- - . G-C , . - .
: ρ- ρ- (ρ ‒ , DP ).
ρ- , 5ʹ→ 3ʹ , (.30.6).
.30.6. ρ-
ρ- , . ρ- , .
- , . : - I, II III. . - I 18S-, 5,8S- 28S- ; - II , ; - III 5S , . - . - (TF-) (. 30.7). .
.30.7.
. 30.7 (TFIIB, E, F, H TBP), - II, ,