Подсчет эритроцитов в исследуемой крови

ЦЕЛЬ: Освоить методику подсчета эритроцитов в камере Горяева, используя знания о функциях, биофизических свойствах эритроцитов и механизмах регуляции количества эритроцитов в периферической крови уметь оценивать результаты лабораторного исследования количества эритроцитов в исследуемой крови.

Методика выполнения работы. Для подсчета количества эритроцитов используется счетная камера Горяева. Она представляет собой толстое стекло, в средней части которого имеется 4 желобка. Между ними образуются 3 узкие пластинки. Средняя пластинка ниже боковых на 0,1 мм и разделена пополам поперечным желобком. По обе стороны от желобка расположены сетки Горяева. Так как высота боковых пластинок на 0,1 мм больше средней, то при наложении на них покровного стекла над сеткой образуется камера глубиной в 0,1 мм. Сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов (15 15). Каждый третий квадрат разделен дополнительно поперечными и продольными линиями на 16 маленьких квадратиков. Таких больших квадратов, разделенных на малые, в сетке 25. Сторона малого квадратика равняется 1/20 мм, площадь - 1/20 1/20 = 1/400 мм². Так называемый «объем малого квадрата» равен 1/400 1/10 =1/400 мм³. В этом объеме подсчитывают эритроциты. Для счета эритроцитов кровь разводят в 200 (или 100) раз.

Последовательность выполнения работы. Обработать безымянный палец левой руки спиртом, проколоть скарификатором, снять ватным тампоном первую каплю крови. Выдавить вторую каплю крови и натянуть в капилляр смесителя (меланжера) крови до отметки 0,5. Не давая крови свернуться, быстро втянуть в капилляр 1% раствор хлорида натрия до отметки 101. Хорошо перемешать кровь с раствором в расширенной части смесителя. Накрыть камеру покровным стеклом и притереть его до появления радужных колец. Выпустить из смесителя первые капли крови и прикоснуться кончиком смесителя к краю покровного стекла. В силу капиллярности раствор заполнит камеру. Считать эритроциты при большом увеличении (можно при малом с окуляром 15).

Сосчитать количество эритроцитов в 80 малых квадратах, т.е. в 5 больших, разделенных на 16 малых. Поскольку эритроциты располагаются в беспорядке и некоторые из них лежат на границах квадратов, для получения точного результата принято считать эритроциты, лежащие внутри квадрата и на верхней и левой границах. Вычислить среднее количество эритроцитов в 1 мм³ неразведенной крови. Рекомендуется на листке бумаги нарисовать 5 больших квадратов, разделенных на 16 малых и в каждый квадрат вносить найденное количество эритроцитов.

ФОРМУЛА ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ЭРИТРОЦИТОВ:

где: Х - искомое число эритроцитов, Э - сумма эритроцитов в 80 малых квадратах, 80 - количество малых квадратов, 200 – разведение крови, 1/4000 - объем малого квадрата

Рекомендации к оформлению протокола. При оформлении протокола нарисовать сетку Горяева и вписать в 80 малых квадратов найденное количество эритроцитов. Сравнить результат исследований крови с нормой. При отклонении от нормы указать возможные причины данного несоответствия.

РАБОТА 2.