NucleoBond Xtra .
:
: -
:
:
: <300 kbp
, . (, , ) . pH ( 2,5 8,5). , .
, - --. , .
:
- E.coli
- E.coli
:
1. E.coli, , .
, , , , , .
: Luria-Bertani (1% , 0,5 % , 1% NaCl). 37 C, (200-250 /) 12-16 . 3-4 , . , , , , .
, . . , .
:
20-60 /.
10-50 /
10-50 /
10-50 /
E.coli . DH5α XL1-Blue , , , HB101 .
: , .
|
|
, , . , (λ=600 ) ( ).
ODV = OD600 x Vol [ mL ]
ODV= 400 NucleoBond Xtra Midi () ODV= 1200 - NucleoBond Xtra Midi ().
2. .
RES, LYS . LYS ( , - ). , .
3.
NEU , . , , .
C12H25SO4Na+ CH3COOK= C12H25SO4K + CH3COONa
. .
4. .
. , .
, . , .
5.
EQU . , , WASH.
6.
ELU. (KCl) pH 7,0 9,0. (15 50 ).
7.
. 15 .
8.
70% 5 . . .
9.
TE . 260 280 .