Рекомендации по выполнению лабораторных работ и составлению отчета

ВВЕДЕНИЕ

 

Методические указания составлены в соответствии с рабочей программой по дисциплине "Биохимия", утвержденной в сентябре 1999 г. Данная дисциплина изучается студентами факультета техно­логии молочных продуктов на 3-м курсе в 6-м семестре. Трудоем­кость изучения дисциплины составляет 198 часов, в т.ч. лаборатор­ные занятия - 52 часа.

Методические указания дополнены и переработаны с учетом формирования у студентов навыков самостоятельной творческой ра­боты. По каждой теме предусмотрены вопросы для самостоятельной подготовки к занятиям, что является одной из форм самоконтроля знаний.

Данные указания являются самостоятельной методической раз­работкой, они содержат 23 работы. Материал изложен таким образом, чтобы работающий мог выполнить ту или иную задачу самостоятель­но, не ожидая указаний со стороны преподавателя. Выполнение этих работ поможет студенту ознакомиться с методами биохимического исследования и тем самым дополнить теоретическую часть изучае­мой дисциплины.

 

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ВЫПОЛНЕНИЮ ЛАБОРАТОРНЫХ РАБОТ И СОСТАВЛЕНИЮ ОТЧЕТА

 

Цель практикума - закрепить знания теоретических основ био­химии, привить студентам навыки самостоятельной и эксперимен­тальной работы.

Поскольку программа практикума рассчитана на самостоятель­ное изучение теории по каждой конкретной работе, то, получив от преподавателя задание по выполнению лабораторной работы, подго­товьтесь к ее выполнению. Для этого ознакомьтесь с рекомендация­ми, приведенными в данных методических указаниях. Изучите теоре­тический материал, пользуясь рекомендованной литературой и кон­спектами лекций. Проверьте усвоение материала, письменно ответив на вопросы самоконтроля, и будьте готовы к собеседованию по ним.

Приступайте к выполнению работы только после разрешения преподавателя; пройдя предварительное собеседование. Результаты опыта обязательно покажите преподавателю.

Работайте в халатах! Перед опытом посуду обмойте дистиллиро­ванной водой, после него удалите продукты реакции и тщательно по­мойте посуду.

Составляя отчет по работе, придерживайтесь следующего плана: название работы, цель работы, ответы на вопросы самоконтроля, ход работы, результаты опыта и наблюдения, выводы.

Все таблицы и уравнения помешайте в разделе отчета «Результа­ты и наблюдения».

При обсуждении результатов четко формулируйте выводы. Сле­дите, чтобы они не подменялись результатами наблюдений и были краткими.

Работа считается зачтенной после представления отчета и ответа на контрольные вопросы преподавателя.

Работа 1, Определение активной кислотности и буферных свойств некоторых биологических жидкостей (2 часа)

Цель занятия - научиться с помощью потенциометра определять рН растворов, изучить буферные свойства молока, слюны, желудоч­ного сока.

Содержание работы. С помощью рН-метра определить рН мо­лока, слюны, препарата желудочного сока, сравнить рН этих жидко­стей и их разведений в 2, 5, 10 раз, сделать выводы о буферное™ данных растворов.

Подготовка к занятии). Студент должен знать, что такое рН, сущность потенциометрического метода определения рН, иметь по­нятие о буферных свойствах растворов и их буферной емкости; знать, какими компонентами обусловлены буферные свойства биологиче­ских жидкостей.

Литература [1, с. 109-120; 4, с. 8-13: 7, с. 206-208].

Вопросы для самоконтроля

1. Что называется водородным показателем?

2. В каких пределах изменяется величина рН растворов (кис­лая, нейтральная, щелочная среда)?

3. Принцип потенциометрического определения рН.

4. Какие растворы называются буферными?

5. Дать понятие буферной емкости.

6. Перечислить основные буферные системы организма.

7. Какова кислотность биологических жидкостей (молока, слюны, желудочного сока) и как она изменяется в зависимости от вида животного или других факторов?

Аппаратура и реактивы: потенциометр, термометр, колбы, ста­канчики, мерный цилиндр, пипетки, молоко, препарат желудочного сока.

 

Ход работы

 

С помощью рН-метра определить рН исследуемых растворов. Для этого, прочитав инструкцию к прибору, включить его в сеть, дать прогреться 10-15 мин. затем в стаканчик на 100 мл до половины на­лить исследуемой жидкости и замерить температуру раствора. Уста­новить данную температуру на шкале прибора. Опустить электроды прибора в раствор так, чтобы они на 0,5 см не доставали до дна ста­кана и были погружены в раствор. По шкале рН потенциометра сде­лать соответствующие замеры.

Замерить рН молока, слюны, препарата желудочного сока.

Приготовить серию разведений этих растворов. Замерить рН раз­бавленных растворов. Данные занести в таблицу.

 

 

 

Исследуемая жидкость	Величина рН	Буферные систе­мы исследуемой жидкости
исходного раствора	разведенного в n-раз
n=2	n = 5	n= 10
Молоко Слюна Препарат желу­дочного сока

Сделать выводы о кислотности и буферности данных биологи­ческих жидкостей.

 

Контрольные вопросы

1.Чем обусловлены слабокислые свойства молока?

2. Как изменяется кислотность молока при хранении?

3. Какова кислотность слюны основных плотоядных и травояд­ных животных?

4. Чем обусловлены слабощелочные свойства слюны коровы и какое это имеет значение в пищеварении жвачных?

5. У какого животного кислотность желудочного сока больше: у коровы или собаки? Почему?

 

Работа 2. Сравнительное действие неорганических катализаторов и ферментов (2 часа)

 

Цель занятия - сравнить каталитические свойства соляной кисло­ты и амилазы слюны.

Содержание работы. Провести термостатирование расторов крахмала с водой, соляной кислотой и слюной, проделать пробы с йодом и Троммера, сделать выводы о каталитической активности амилазы слюны.

Подготовка к занятию. Необходимо знать природу ферментов, химическое строение молекул крахмала, химизм гидролиза крахмала, продукты гидролиза (полного и частичного), химизм реакции Тром­мера.

Литература [2, с. 304-306, 45, 47; 6. с. 265-268, 277. 182-187; 7. с. 148; 9, с. 157-166,260-262].

 

Вопросы для самоконтроля

1 Понятие о ферментах.

2. Химическая природа ферментов.

3. Уравнение гидролиза крахмала с образованием промежуточных и конечных продуктов.

4. Где вырабатывается фермент амилаза?

 

Аппаратура и реактивы: пробирки, пинетки, водяная баня, спир­товка, 1%-ный раствор крахмала, 10%-ный раствор НСl, раствор йода в йодистом калии, 10%-пый раствор NаОН, 3%-ный раствор СuS0₄.

 

Ход работы

 

В три пробирки налить по 5 мл 1%-ный раствора крахмала. Затем в первую пробирку добавить 1 мл дистиллированной воды, во вторую - 1 мл 10%-ного раствора НСl,в третью - 1 мл слюны. Содержимое пробирок перемешать и поставить пробирки №1 и №3 в водяную ба­ню при 38 °С, а пробирку №2 - в кипящую водяную баню.

Через 15-20 мин пробирки охладить и взять из них по 1-2 мл для проведения пробы с йодом и Троммера. Перед проведением пробы Троммера содержимое пробирки №2 нейтрализовать раствором ще­лочи. Полученные результаты занести в следующую таблицу:

 

 

 

№ пробирки	Субстрат	Катализатор	После нагревания
проба с йодом	реакция Троммера
	крахмал	-
	крахмал	соляная ки­слота
	крахмал	амилаза слюны

 

Сделать вывод об активности неорганического катализатора и фермента.

Контрольные вопросы

1, Где осуществляется гидролиз крахмала в организме?

2. Механизм ферментативного катализа.

 

Работа 3. Специфичность действия ферментов (2 часа)

 

Цель занятия - изучить свойство избирательного ферментатив­ного действия на примере амилазы слюны.

Содержание работы. Провести термостатирование растворов крахмала и сахарозы со слюной, проделать реакцию Троммера. сде­лать вывод о специфичности амилазы.

Подготовка к занятию. Необходимо знать механизм действия ферментов, виды специфичности, химическое строение молекул крахмала и сахарозы, химизм гидролиза крахмала и сахарозы, сущ­ность реакции Троммера.

Литература [2. с. 304-324, 299-306, 45, 47; 6, с. 175-177, 182-187, 265-268; 7, с. 63, 151-152].

 

Вопросы для самоконтроля

1. Что такое фермент?

2. Химическая природа ферментов.

3. Каков механизм действия ферментов?

4. Чем обусловлена избирательность действия ферментов?

5. Какие виды специфичности характерны для ферментов?

6. Напишите реакцию гидролиза крахмала.

7. В каких пищеварительных соках содержатся ферменты амила­за, мальтаза, сахароза?

8. В каком отделе пищеварительного тракта осуществляется гид­ролиз крахмала у животных и человека?

 

Аппаратура и реактивы: водяная баня, набор пробирок, спиртов­ка, пипетки на 5 и 1мл, 1%-ные растворы крахмала, сахарозы, 10%-ный раствор гидроксида натрия, 5%-ный раствор сульфата меди.

Ход работы

 

В одну пробирку налить 5 мл 1%-ного раствора крахмала, в дру­гую - 5 мл 1%-ного раствора сахарозы. В обе пробирки добавить по 5 мл слюны. Поместить пробирки на водяную баню при 38-40^СС на 10-15 мин.

Для получения слюны в рот набирают 10-15 мл дистиллирован­ной воды, выдерживают 2-3 мин, переносят в стаканчик. После этого с содержимым пробирок делают реакцию Троммера, позволяющую определить наличие в растворе углеводов, которые имеют в молекуле свободную карбонильную группу (альдегидную или кетонную). К их числу принадлежат все моносахариды и многие дисахариды, в том числе и мальтоза.

Для выполнения пробы Троммера возьмите в чистые пробирки по 1мл исследуемой жидкости, прилейте к ней такое же количество 10%-ного гидроксида натрия и по каплям 5%-ный раствор сульфата меди до появления не исчезающей мути (гидроксида меди).

Осторожно нагрейте в пламени спиртовки верхнюю часть всех растворов, проследите за изменением окраски.

Сделайте логические выводы о происходящих реакциях и специ­фичности фермента амилазы.

Определите вид специфичности амилазы.

 

Контрольные вопросы

1. Почему реакция Троммера дает отрицательный эффект с рас­творами крахмала и сахарозы?

2. Чем обусловлена специфичность фермента амилазы?

3. Почему гидролиз крахмала не завершается в желудке живот­ных и человека?

4. В каком отделе пищеварительного факта и в виде какого со­единения происходит всасывание продуктов гидролиза крахмала в кровь?

 

Работа 4. Термолабильность ферментов (2 часа)

 

Цель занятия - изучить влияние температуры на активность сы­чужного фермента и амилазы.

Содержание работы. Провести термостатирование раствора крахмала с кипяченой и некипяченой слюной, молока с сычужным ферментом.

С раствором крахмала проделать качественные реакции на йод и Троммера.

Сделать вывод о чувствительности ферментов к низким, высоким и средним температурам.

Подготовка к занятиям. Необходимо знать химическую природу и механизм действия ферментов, химизм реакции гидролиза крахмала и механизм действия сычужного фермента, сущность реакции Тром­мера, влияние температуры на скорость реакции.

Литература [4. с.133-136, 139-144, 197-198, 252-253; 9, с. 154-182; 2,с.299-324].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Что такое ферменты?

2. Химическая природа ферментов.

3. Химическая структура простых (протеинов) и сложных (про­теидов) ферментов.

4. Что такое денатурация белка?

5. Влияние температуры на активность ферментов (изобразить графически).

6. Написать уравнение реакции гидролиза крахмала.

7. Что такое химозин? Где он вырабатывается и на какой субстрат действует?

 

Аппаратура и реактивы: водяная баня, набор пробирок, спиртов­ка, водный раствор сычужного фермента в 0,9%-ном растворе №01, пипетки на 2 и 5 мл. 1%-ный водный раствор крахмала, 5%-ный рас­твор сульфата меди, молоко, лед, раствор йода в йодистом калии.

 

Ход работы

Опыт 1. Влияние температуры на активность амилазы слюны

Налить в три пробирки по 5 мл 1%-ного раствора крахмала. В од­ну из них добавить 1 мл слюны, предварительно нагретой до кипения, в другую - 1 мл не нагретой слюны, в третью - слюну не добавлять.

Тщательно перемешать содержимое пробирок, поставить их в водяную баню при температур 37°С на 15 мин.

Затем с содержимым пробирок провести пробу с йодом. Для этого отлить из каждой по 1 мл раствора в чистые пробирки и доба­вит к ним по 1-2 капли раствора йода в йодистом калии. Наблюдать полученную окраску растворов.

С содержимым исходных пробирок проделать пробу Троммера, взяв из каждой по 1 мл жидкости.

Добавить к этому количеству по 1 мл 10%-ного раствора гидроксида натрия и несколько капель 5%,-ного раствора сульфата меди до образования голубого осадка. Нагреть в пламени спиртовки до нача­ла разложения гидратов. Проследить, где появится красная окраска.

Сделать вывод о наличии продуктов гидролиза крахмала.

 

Опыт 2. Влияние температуры на активность сычужного фермента

В три пробирки налить по 2 мл 0,1%-ного раствора сычужного фермента. Содержимое первой пробирки вскипятить. Затем все три поставить в холодную волу, наклеить этикетки. Прилить в каждую пробирку 2 мл молока, перемешать и поставить вторую пробирку в ле­дяную воду, а две другие - в водяную баню при 38-40°С на 8-10 мин.

Наблюдать, что произойдет с молоком в первой и третьей про­бирках.

Проследите, происходят ли изменения с молоком в ледяной воде.

Поместите вторую пробирку из ледяной воды в баню при темпе­ратуре 38-40°С и наблюдайте, свернется ли молоко. Сделайте общий вывод по двум опытам о влияния низкой и высокой температуры на активность ферментов.

Контрольные вопросы

 

1. Какова зависимость между температурой и скоростью фермен­тативных реакций?

2. Приведите примеры использования высоких и низких темпера­тур в животноводстве, молочной и пищевой промышленности, в бы­ту.

3. Изобразите графически влияние температуры на скорость ре­акции с участием неорганических катализаторов и биологических ка­тализаторов-ферментов. Объясните различие.

 

Работа 5. Влияние рН на действие ферментов (2 часа)

 

Цель занятия - изучить влияние концентрации водородных ионов на ферментативную активность амилазы слюны.

Содержание работы. Провести гидролиз крахмала в присутст­вии слюны при различной кислотности среды. Сделать выводы о ско­рости ферментативной реакции при разном значении рН.

Подготовка к занятию. Необходимо знать, что такое рН и как кислотность среды влияет па диссоциацию и пространственную кон­фигурацию белковой молекулы, механизм действия ферментов, хи­мизм гидролиза крахмала.

Литература [4, с. 133-136, 139-144, 197-198, 252-253; 9, с. 154-182; 2, с. 299-324].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Что такое фермент?

2. Какова химическая природа ферментов?

З.Как влияет кислотность среды на диссоциацию белков? 4.Почему концентрация водородные ионов в среде влияет на ак­тивность ферментов.

5. Как окрашиваются йодом декстрины?

6. Как приготовить буферный раствор?

 

Аппаратура и реактивы: водяная баня с термометром, штатив с пробирками, пипетки, раствор фосфата натрия однозамещенного, фосфата натрия двузамещенного, раствор крахмала, раствор йода в йодистом калии.

Ход работы

 

Пронумеровать шесть пробирок и приготовить в них фосфатные буферные смеси с различным значением рН по схеме:

 

Реактивы	№ пробирки
№Н2Р04 (мл) №2НР04 (мл)	4,7 0,3	4,4 0,6	2,5 2,5	1,7 3,3	0,6 4,4	0,3 4,7
рН буферной смеси	5,6	6,0	6,8	7,0	7,8	8,1
Окраска растворов

 

Вдругие шесть пробирок палить по 5 мл крахмала, добавить по 1 мл фосфатной буферной смеси с различным значением рН. Затем в каждую пробирку добавить по 1 мл разведенной слюны (1:1), тща­тельно перемешать содержимое пробирок и поставить в водяную ба­ню при 38-40°С. Через 3-5 мин из пробирки № 3 взять несколько ка­пель раствора и провести реакцию с йодом на стекле. Повторить про­бу до тех пор, пока не произойдет полного расщепления крахмала (сохраняется желтая окраска йода).

После этого пробирки вынуть из бани и добавить в каждую по 1- 2 капли йода. Наблюдать появление различной окраски в соответст­вии с глубиной ферментативного гидролиза крахмала.

Записать результаты в таблицу и сделать выводы о значении рН среды, наиболее благоприятном для действия амилазы.

 

Контрольные вопросы

1. Объясните, почему амилаза слюны теряет свою активность при попадании в желудок?

2. Где преимущественно осуществляется гидролиз крахмала в ор­ганизме животного?

3. Приведите пример фермента, активного только в кислой среде.

 

 

Работа 6. Активирование и торможение действия фермента амилазы (2 часа)

 

Цель занятия - изучить влияние активаторов и ингибиторов на ферментативный гидролиз крахмала.

Содержание работы. Провести гидролиз крахмала со слюной в присутствии ионов К⁺, Na⁺, С1^-, Сu²⁺, в водном растворе, сделать вы­воды о глубине ферментативного гидролиза крахмала в присутствии ингибиторов и активаторов.

Подготовка к занятию. Необходимо знать механизм фермента­тивного гидролиза крахмала, роль активаторов ферментативных про­цессов, обратимые и необратимые ингибиторы ферментов, механиз­мы образования активных ферментов из проферментов.

Литература [2, с. 297; 315; 4, с. 133-145,197-198; 7, с. 165-175,262].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Роль и природа ферментов.

2. Что собой представляют активаторы ферментов?

3. Механизм торможения ферментов.

4. Виды ингибирования.

5. Привести примеры активаторов ферментов.

6. Привести примеры ингибиторов ферментов.

 

Аппаратура и реактивы: водяная баня с термометром, штатив с пробирками, пипетки, 1%-ные водные растворы хлорида натрия, ка­лия, сульфата меди, ацетата меди, 1%-ный раствор крахмала, раствор йода в йодиде калия.

 

Ход работы

 

В четыре пробирки налить по 1 мл 1%-ного раствора NаСl, КСl, СuS0₄ и (СН₃СОО)₂Сu (каждый раствор в отдельную пробирку), в пя­тую пробирку - 1 мл дистиллированной воды. Добавить в каждую пробирку по 2 мл раствора крахмала и по 1 мл слюны. Перемешать содержимое пробирок и поместить их в водяную баню при 38-40°С. Через 2-3 мин из пробирки № 5 взять несколько капель на стекло и провести реакцию с йодом. При появлении фиолетово-красного ок­рашивания вынуть пробирки и поместить их в стакан со льдом.

Затем в каждую пробирку добавить по 1-2 капли йода и сравнить окраску растворов. Результат занести в таблицу и сделать выводы об активирующем и ингибирующем действии ионов на амилазу слюны.

 

Показатели	Содержимое пробирок
NаСl	КСl	CuSO4	(СНзСОО)2Сu	Н2О
Окраска
Продукты гидролиза.

 

Контрольные вопросы

1. Какие ионы являются активаторами амилазы слюны?

2. На основании чего сделан такой вывод?

3. Какие ионы служат ингибиторами амилазы?

4. Назовите активаторы и парализаторы, образуемые животным эрганизмом.

5. Значение ингибиторов для живых организмов.

 

 

Работа 7. Качественные реакции на витамины А и С (2 часа)

 

Цель занятия — знать водо- и жирорастворимые витамины, их влияние на обмен веществ, источники витаминов в пище, приобрести навыки качественного определения витаминов А и С.

Содержание работы. Провести качественные реакции на вита­мины А и С.

Подготовка к занятию. Необходимо знать классификацию ви­таминов, их влияние на обмен веществ, источники витаминов в пище.

Литература [% с. 238-245. 274-281; 4, с. 104-110. 131-133].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1.Кто впервые открыл существование биологически активных веществ, позднее названных витаминами?

2. В чем значение витаминов для организма?

3. Назовите водорастворимые и жирорастворимые витамины.

4. Напишите структурные формулы витаминов А и С.

 

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками (8 шт.); пипетки; спиртовка; исследуемый раствор, содержащий витамин С; 10%-ный раствор рыбьего жира в хлороформе; 1%-ный раствор хлорида железа ( III ); концентрированная серная кислота; 0,1%-ный раствор йода в йодистом калии; 10%-ный раствор ТМа₂СО; 0,01%-ный раствор метиленовой сини; 45%-ный раствор красной кровяной соли.

 

Ход работы

 

1 Качественные реакции на витамин А

Проба с хлоридом железа ( III ). В пробирку налить 5 мл раствора рыбьего жира в хлороформе и добавить несколько капель (1-2 мл)

1%-ного раствора хлорида железа ( III ). В присутствии витамина А раствор окрашивается в ярко-зеленый цвет.

Проба с серной кислотой. В пробирку налить 5 мл раствора рыбьего жира в хлороформе и 1-2 мл концентрированной серной ки­слоты. При наличии витамина А появляется синяя окраска, сменяю­щаяся фиолетовой, а затем красно-бурой.

 

2. Качественные реакции на витамин С

Проба с йодом. В две пробирки налить по 10 капель дистиллиро­ванной воды и по 1-2 капли 0,1%-ного раствора йода в йодистом ка­лии. Добавить в одну пробирку 10 капель дистиллированной воды, в другую - 10 капель вытяжки из исследуемого материала. Отметить, что происходит с окраской жидкостей в той и другой пробирке. Объ­яснить уравнение происходящей реакции:

 

Проба с метиленовым синим. В две пробирки налить по 1 капле 0,01%-ного раствора метиленовой сини и 10%-ного раствора соды. В одну пробирку добавить 5 капель дистиллированной воды, в другую -5 капель вытяжки из исследуемого.материала. Нагреть обе пробирки одновременно на спиртовке, наблюдать за изменением окраски.

Проба с красной кровяной солью и хлоридом железа (Ш). В од­ну пробирку налить 1-2 мл дистиллированной воды, в другую - такой же объем вытяжки из исследуемого материала. В обе пробирки добавить по несколько капель раствора красной кровяной соли и по не­сколько капель раствора хлорида железа. В присутствии витамина С появляется зеленое окрашивание.

Вопросы для самоконтроля

 

1. Назовите основные источники витаминов А и С в пище.

2. Какое значение для нормального состояния костной ткани име­ет аскорбиновая кислота?

3. Какова роль витамина А в обмене веществ?

 

Работа 8. Качественные реакции на витамин Д (2 часа)

 

Цель занятия- изучить реакции определения наличия витамина Д, знать его свойства.

Содержание работы. Провести качественные реакции на вита­мин Д.

Подготовка к занятию. Необходимо изучить строение, получе­ние в организме и химические свойства витамина Д, а также его биологическое действие.

Литература [2, с. 238-249; 7, с. 166: с. 125-132].

Вопросы для самоконтроля

 

1. Напишите формулу одного из витаминов группы Д.

2. Каков химизм образования витамина Д из провитамина в коже под действием УФ лучей?

3. Какова биологическая роль витамина Д?

4. Источники витамина Д для сельскохозяйственных животных.

5. Меры профилактики Д-авитаминоза для молодняка сельскохо­зяйственных животных и птиц.

 

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, спиртовка, ры­бий жир или витамин Д, раствор брома в хлороформе (1:60), хлоро­форм, анилиновый реактив.

 

Ход работы

 

Бромхлороформная проба. В сухую пробирку внести 2-3 капли рыбьего жира или 1 каплю концентрированного витамина Д и 2-4 капли раствора брома в хлороформе. Наблюдать появление зеленовато-голубого окрашивания.

Анилиновая проба. В сухую пробирку внести 2 капли рыбьего жи­ра и 10 капель хлороформа, а затем при постоянном помешивании 1-2 капли анилинового реактива. Осторожно нагреть при постоянном по­мешивании и кипятить 30 с. Наблюдать переход желтой эмульсии в зеленый, а затем в красный цвет.

Параллельно проводят опыт с холостой пробой (без витамина Д).

 

Контрольные вопросы

1. Почему птицы страдают от недостатка витамина Д в большей степени?

2. Источником каких витаминов является желток куриного яйца?

 

Работа 9. Качественные реакции на никотиновую кислот (2 часа)

 

Цель занятия - изучить химические свойства, строение и биоло­гическую роль витамина РР (В5).

Содержание работы. Провести качественную реакцию на вита­мин РР.

Подготовка к занятию. Изучить строение, химические свойства, биологическое действие никотиновой кислоты.

Литература [2, с. 265-269: 7, с, 170-172; 9, с. 142-143].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Какова химическая роль витамина РР?

2. В состав какого фермента входит никотиновая кислота в виде амида?

3. Какова биологическая роль никотиновой кислоты?

 

Аппаратура и реактивы: фарфоровая чашка, водяная баня, пи­петка с грушей, стеклянная палочка, 0,1% раствора никотиновой ки­слоты, 1%-ный спиртовой раствор, 2,4-динитрохлорбензола (ядо­вит!), 0,1%-ный спиртовой раствор щелочи.

Ход работы

 

В фарфоровую чашку налить 1 мл никотиновой кислоты и вы­парить досуха на водяной бане. К сухому остатку добавить с помощью пипетки с грушей 1 мл раствора 2,4-динитрохлорбензола, пе­ремешать и снова выпарить на водяной бане. Нагревать сухой оста­ток в течении 10-15 минут, остудить и добавить 3 мл спиртового раствора щелочи. Наблюдать появление розовато-фиолетовой окра­ски в присутствии никотиновой кислоты.

 

Контрольные вопросы

 

1. Что такое пеллагра и причины ее возникновения?

 

Работа 10. Качественная реакция на адреналин (2 часа)

 

Цель занятия - освоить качественные реакции на адреналин.

Содержание работы. Провести качественные реакции на адрена­лин.

Подготовка к занятию. Изучить химическое строение и механизм действия адреналина, разобраться в нсйрогуморалыюй системе регу­ляции углеводного обмена.

Литература [2, с. 69-70, 387-389; 7, с. 178-179].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Каково химическое строение адреналина?

2. Где синтезируется гормон адреналин?

3. Регуляция углеводного обмена и роль адреналина в нем.

4. Взаимосвязь адреналина с другими гормонами.

 

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, спиртовка, адре­налин, водный раствор (содержимое ампулы растворить в 100 мл во­ды), йод, 0,1%-ный раствор йодного натра.

 

Ход работы

 

Опыт 1. К 1 мл водного раствора адреналина прилить I каплю 0,1 н. раствора йода, нагревать до появления розового или красного окрашивания, в результате образования продуктов окисления адрена­лина.

Опыт 2. К 1-2 мл водного раствора адреналина добавить несколь­ко капель раствора хлорида железа. Жидкость окрашивается в зеле­ный цвет, который при добавлении щелочи переходит в красный.

 

Контрольные вопросы

 

1.Что происходит в организме при повышении и понижении со­держания адреналина в крови?

2. Как связан стресс с углеводным обменом?

 

Работа 11. Качественные реакции на дисахариды (3 часа)

 

Цель занятия - ознакомиться с основными свойствами дисахаридов: инверсией, реакциями восстановления металлов и образованием озазонов.

Содержание работы, выполнить реакции восстановления дисахаридами металлов, цветные реакции на дисахариды, пробы на бро­жение.

Подготовка к занятию. Необходимо знать физические и химиче­ские свойства основных дисахаридов - мальтозы, лактозы, сахарозы, их структурные формулы, оптическую активность, химизм гидролиза дисахаридов и суммарные уравнения спиртового, молочно - и маслянокислого брожения.

Литература [ 2, с. 31-34; 4,с.55-56; 6, с. 31-33; 7, с. 64-65,77-80].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Написать структурные формулы мальтозы, лактозы, сахарозы, целлобиозы.

2. Чем обусловлена оптическая активность дисахаридов?

3. Какие дисахариды способны восстанавливать металлы, какие нет?

4. Записать управления гидролиза сахарозы, лактозы, мальтозы.

5. Написать уравнение спиртового, молочнокислого брожения.

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, пипетки, сахаро­за, мальтоза, 1% и 5%-ные растворы, соляная кислота, лакмус, гидроксид натрия (10%-ный раствор); сернокислая медь (1%-ный раствор); кобальт сернокислый (2%-ный раствор); фенилгидразин солянокис­лый, уксуснокислый натрий, дрожжи.

Ход работы

 

Опыт 1. Реакции восстановления, металлов. Налить в пробирки по 2-Змл растворов мальтозы, лактозы и 2 пробирки раствора сахарозы. В одну из пробирок с сахарозой прибавить несколько капель соляной кислоты, перемешать и кипятить на спиртовке 3 -5 мин. Затем охла­дить и нейтрализовать по лакмусу раствором гидроксида натрия. Со всеми пробами провести реакцию Троммера.

Опыт 2. Проба на сахарозу с сернокислым кобальтом. В пробирку налить 2 - 3 мл раствора сахарозы, прибавить несколько капель 2%-ного сульфата кобальта. При добавлении 1 мл щелочи наблюдать характерное (фиолетовое) окрашивание.

Опыт 3. Реакция на мальтозу и лактозу с фенилгидразином. В 2 пробирки налить 2-Змл воды, прилить 5-8 капель фенилгидразина. 1 мл крепкой уксусной кислоты, 2-3 мл 5%-ного раствора мальтозы и лактозы. Полученные прозрачные смеси нагреть на водяной бане 10-15 мин. Наблюдать обильное выделение озазонов в виде мелких игольчатых кристаллов. Пробирки вынуть из бани, охладить и иссле­довать полученные кристаллы под микроскопом. Зарисовать кри­сталлы.

Опыт 4. Проба на брожение. В четыре пробирки налить по 10мл: в первую - 2%-ного раствора глюкозы, во вторую -2%-ного раствора сахарозы, в третью - 2%-ного раствора лактозы и четвертую - дис­тиллированной воды.

Во все четыре пробирки внести по 0,5 г предварительно растер­тых стеклянной палочкой дрожжей (нельзя перекладывать стеклян­ную палочку из одной пробирки в другую, предварительно не промыв ее) тщательно перемешать с растворами в пробирках.

Все четыре пробирки поместить на 5 мин в термостат с темпера­турой 27-30 °С.

Раствор глюкозы с дрожжами из первой пробирки перелить в бродильную трубку Эйнгорна так, чтобы колено было заполнено жидкостью, ополоснуть 2 раза пробирку 2 мл 2%-ного раствора глю­козы, каждый раз сливая в ту же бродильную трубку. Содержимое 2, 3 и 4-й пробирок вылить соответственно в бродильные трубки, также споласкивая соответствующим раствором.

Все четыре бродильные трубки поставить в термостат с темпера­турой 25 °С. Через 30 мин отмстить результаты брожения по коли­честву выделившегося углекислого газа.

Результаты опытов занести в таблицу:

Углевод	Проба Троммера	Реакция с фе- нилгидразином	Проба на брожение
Сахароза
Мальтоза
Лактоза
Общие выводы

Контрольные вопросы

 

1. Какие виды брожения углеводов используются в молочной промышленности? При производстве каких продуктов?

 

Работа 12. Качественные реакции на полисахариды (3 часа)

Цель занятия - ознакомиться с цветными реакциями на крахмал, условиями гидролиза крахмала и клетчатки.

Содержания работы. Провести качественные реакции на крах­мал (проба с йодом) и продукты его гидролиза, провести реакции ки­слотного и ферментативного гидролиза крахмала и клетчатки.

Подготовка к занятию. Необходимо знать структурные формулы полисахаридов, изучить физические и химические свойства крахмала, гликогена и клетчатки, продукты и условия их гидролиза.

Литература: (2, с.35-44; 4, с. 56-60; 6. с. 34-40; 7, с.80-86.)

Вопросы для самоконтроля

 

1. Какие гетеро- и гомополисахариды Вы знаете? Приведите их структурные формулы.

2. Написать схему гидролиза крахмала с указанием промежуточ­ных продуктов гидролиза. Указать окраску декстринов в реакции с йодом.

3. В каких отделах пищеварительного тракта происходит расще­пление крахмала и клетчатки?

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, пипетки, спир­товка, баня водяная. Крахмал (1%-ный раствор), соляная кислота, гидроксид натрия 10%-ный раствор, сульфат меди, 5%-ный раствор, раствор йода, серная кислота (3:1).

Опыт 1. Качественные реакции на крахмал с йодом и проба Троммсра. В 2 пробирки налить по 2-3 мл крахмала, в первую доба­вить 2-3 капли йода, во вторую - 2 мл щелочи и 2-3 капли сульфата меди. Вторую пробирку нагреть до кипения. Записать наблюдаемые результаты изменения окраски растворов.

 

Опыт 2. Гидролиз крахмала кислотой. Налить в пробирку 5-10 мл крахмала и несколько капель соляной кислоты, перемешать, проки­пятить. Через 1-2 мин после начала кипения взять несколько капель раствора пипеткой и вылить в пробирку с 5-6 мл дистиллированной воды, сюда же добавить 1-2 капли раствора йода. Повторять пробы через следующие 1-2 мин. пока не получится отрицательная реакция - жидкость принимает цвет йода - желтый.

С продуктами гидролиза провести реакцию Троммера.

Результаты записать в таблицу:

 

№ п.п.	Исследуемое вещество	Проба Троммера	Проба с йодом	Выводы
1. 2.	Раствор крахмала Гидролизат 1-я проба 2-я проба 3-я проба

 

 

Опыт 3. Гидролиз клетчатки. В пробирку поместить кусочек ва­ты, залить ее крепким раствором серной кислоты. После полного рас­творения (через 15-20 мин) раствор развести водой в 15-20 раз и ки­пятить. После окончания гидролиза нейтрализовать раствором щело­чи до резкощелочной реакции и по каплям добавить сульфат меди. Провести до конца реакцию Троммера. Сделать выводы.

 

Контрольные вопросы

 

1. В чем заключается сходство и различие между ферментатив­ным и кислотным способами гидролиза крахмала? Объясните причи­ну различия.

2. Какие ферменты желудочно-кишечного тракта участвуют в процессах гидролиза углеводов?

3. Как используется ферментативный гидролиз в молочной про­мышленности? Приведите примеры.

 

Работа № 13. Растворение и эмульгирование жиров. Исследование молока под микроскопом (3 часа)

 

Цель занятия - изучить физико-химические свойства жиров.

Содержание работы. Наблюдать процессы растворения, эмуль­гирования жиров, наблюдать под микроскопом эмульсию молочного жира.

Подготовка к занятию. Вспомнить из органической химии хи­мический состав жиров, их свойства. Изучить процессы метаболизма липидов в организме, роль желчи в процессе их переваривания, на­рушения липидного обмена.

Литература [2, с. 71-111; 4, с. 225-251].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Какие вещества называются липидами?

2. Какие функции выполняют липиды в организме?

3. Какова химическая природа нейтральных жиров?

4. Какие жирные насыщенные и ненасыщенные кислоты входят в состав липидов?

5. Переваривание липидов в организме, роль желчи.

6. Написать в тетради структурные формулы холестерина и од­ной из желчных кислот.

7. Написать все возможные формулы триацилглицеринов, со­держащих в своем составе пальмитиновую, олеиновую к стеарино­вую кислоты.

8. Написать уравнение реакции омыления жира.

 

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, пипетки, пред­метное и покровное стекла, шпатель, микроскоп, жир, серный эфир, хлороформ, спирт, 10%-ный раствор Nа₂СО₃, белок.

Ход работы

 

Растворение жиров. В четыре сухих пробирки поместить по 3-4 капли исследуемого жира. Затем в первую пробирку налить 2-3 мл дистиллированной воды, во вторую - серного эфира, в третью - хлороформа, в четвертую - спирта. Взболтать содержимое всех проби­рок, поставить в штатив и наблюдать за состоянием жидкостей. Запи­сать результаты в тетрадь и объяснить, что происходит в каждой из четырех пробирок.

Эмульгирование жиров. Взять пять пробирок. В каждую из них налить по 3 мл дистиллированной воды и несколько капель жира. За­тем во вторую пробирку добавить 2-3 капли 10%-ного раствора соды, в третью - желчи, в четвертую - белка, в пятую - раствор кислоты.

Взболтать содержимое всех пробирок, поставить на 5 мин в штатив и наблюдать стойкость эмульсии. Результаты занести в следующую таблицу:

 

№ пробирки	Содержимое пробирок	Наблюдения, выводы

 

Исследование жировых шариков молока. Взять пипеткой каплю молока и поместить ее на предметное стекло. Накрыть каплю покров­ным стеклом и наблюдать под микроскопом. Зарисовать и объяснить наблюдаемую под микроскопом картину.

 

Контрольные вопросы

 

1. В чем растворяются жиры?

2. Какие системы называют эмульсиями? В чем их отличие от ис­тинных растворов?

3. Объясните эмульгирующее действие мыла, желчи, белка.

4. Каков механизм действия Na₂Co₃ при добавлении его к жиру? Напишите уравнение реакции.

 

Работа № 14. Качественные реакции на желчные кислоты (2 часа)

 

Цель занятия — изучить химические свойства желчных кислот, каче­ственную реакцию на их наличие.

Содержание работы. Проделать качественную реакцию на опре­деление желчных кислот в растворе, подтвердить свойства их по­верхностной активности.

Подготовка к занятию. Изучить строение, получение в организ­ме и химические свойства желчных кислот, биологическую роль желчных кислот в организме.

Литература [2, с. 85; 4, с. 226].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Написать в тетради структурные формулы желчных кислот.

2. Что такое парные желчные кислоты?

3. Какую роль играют желчные кислоты в процессе переварива­ния липидов?

4. Что такое холеиновые кислоты?

5. Какое вещество является предшественником в синтезе желч­ных кислот в организме?

 

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, 5%-ный раствор сахарозы, концентрированная серная кислота, серный порошок, желчь.

 

Ход работы

 

Реакция Петтенкофера. Налить в пробирку 2-3 мл разведенной в 2-3 раза желчи, прибавить к ней 2 капли 5%-ного раствора сахарозы и слегка встряхнуть. По стенке пробирки (осторожно!) подлить 1-2 мл концентрированной серной кислоты. Наблюдайте появление окраски на границе двух жидкостей. При осторожном перемешивании содер­жимое пробирки окрасится в красный цвет.

 

Проба на понижение поверхностного натяжения. В первую про­бирку налить 10 мл дистиллированной воды, во вторую - 9 мл желчи и 1 мл воды, в третью - 1 мл желчи и 9 мл воды. Во все три пробирки на поверхность жидкости осторожно насыпать немного тонко из­мельченной серы. Пронаблюдать происходящее с порошком серы. Сделать выводы.

 

Контрольные вопросы

 

1.В чем заключается химизм реакции Петтенкофера?

2. Как влияют желчные кислоты на поверхностное натяжение?

3.Объяснить поверхностную активность желчных кислот исходя из строения их молекул.

4. В каком виде они находятся в организме в составе желчи?

 

Работа № 15. Качественные реакции на желчные пигменты (2 часа)

 

Цель занятия - изучить химические свойства и качественные ре­акции на желчные пигменты.

Содержание работы. Проделать качественную реакцию с азот­ной кислотой в пробирке и на бумаге.

Подготовка к занятию. Изучить химическое строение, механизм образования и пути выделения желчных пигментов в организме.

Литература [2, с. 196, 202, 426].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Из чего в организме образуются желчные пигменты?

2. Напишите структурную формулу билирубина.

3. Какой цвет имеют биливердин, билирубин, билицианин, холегелин?

4. Как выделяются желчные пигменты из организма?

5. Напишите схему превращения гемоглобина в уробилин и стеркобилин.

 

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, желчь, азотная кислота, фильтровальная бумага.

 

Ход работы

 

Проба Гмелина. В пробирку налить 1 мл желчи и осторожно по стенке подслоить 1 мл концентрированной азотной кислоты. На гра­нице жидкостей образуется осадок из желчных кислот и белка, окра­шенный окисленными желчными пигментами.

Проба на фильтровальной бумаге. Профильтровав небольшое количество желчи (3-4 мл) через бумажный фильтр, разверните фильтр на стекле и в центр фильтра поместите каплю концентриро­ванной азотной кислоты. Присутствующие в желчи пигменты обра­зуют вокруг капли ряд цветных колец.

 

Контрольные вопросы.

 

1.На чем основаны качественные реакции на желчные пигменты с применением азотной кислоты?

2. Назовите желчные пигменты, образующиеся при взаимодейст­вии желчи с азотной кислотой.

3. Можно ли различить желчь коровы и свиньи по внешнему виду?

 

Работа № 16. Холестерин и определение его в желчи с помощью реакции Сальковского (3 часа)

 

Цель занятия - изучить строение, физические свойства холесте­рина и реакцию его обнаружения.

Содержание работы. Экстрагировать холестерин из желчи и подтвердить его наличие с помощью реакции Сальковского.

Подготовка к занятию. Изучить строение, химизм образования, биологическую роль и патологию обмена холестерина. Литература [2, с. 77, 85-86; 4, с. 247; 7, с. 101].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Напишите структурную формулу холестерина.

2. К какой группе органических соединений относится холесте­рин?

3. Какие биологически активные вещества образуются в организ­ме из холестерина?

4. В каком виде холестерин удаляется из организма?

5. Что такое гиперхолестеринемия и в чем ее отрицательное дей­ствие?

 

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, фарфоровая чашка, желчь, серный эфир, хлороформ, концентрированная серная кислота, водяная баня.

 

Ход работы

 

В фарфоровую чашку налить 10-15 мл неразведенной желчи и выпарить досуха на водяной бане. Остаток несколько раз экстрагиро­вать небольшим количеством эфира. Экстракты слить в фарфоровую чашку. Выпаривать эфир досуха в вытяжном шкафу. Сухой остаток в чашке растворить в 5 мл хлороформа и сверху осторожно подслоить хлороформный экстракт из одной пробирки. На границе жидкостей должно образоваться темно-красное кольцо с зеленоватой флюорес­ценцией.

 

Контрольные вопросы

 

1. В каких органах и тканях холестерин содержится в наибольшем количестве?

2. Каков химический состав желчных камней?

 

Работа № 17. Белки молока (2 часа)

 

Цель занятия - знать фракционный состав белков молока, уметь разделять белки на фракции.

Содержание работы. Провести разделение белков молока на фракции методами осаждения.

Подготовка к занятию. Необходимо знать из курса органической химии состав и строение белков, изучить фракционный состав белков молока, их свойства.

Аппаратура и реактивы: спиртовка, штатив с пробирками (4 шт.), воронка, фильтры, молоко, 1%-ный раствор уксусной кислоты, 1%-ный раствор углекислого натрия, насыщенный раствор сернокислого аммония, кристаллический (NH₄)₂ SO₄.

Литература [2, с. 478; 4, с. 326; 7, с. 217].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Какие белки и в каком количестве содержатся в молоке?

2. Какие свойства характерны для белков молока?

3. Назовите факторы устойчивости белков (гидрофильных коллоидов) в водном растворе.

4. Что такое высаливание?

5. Почему белки молока называются иммунными?

 

Ход работы

 

Опыт 1. Налить, в пробирку 1 мл молока и 2-3 мл воды, перемешать и добавить 1%-ный раствор уксусной кислоты до прекращения выпадения осадка казеиногена. Необходимо учитывать, что при избытке уксусной кислоты казеиноген может раствориться. Осадок отфильтровать и промыть в небольшом количестве воды (3 мл). Казеиноген вместе с жиром молока остается на фильтре, а альбумин и глобулин переходят в фильтрат. Добавить к фильтрату 2-3 капли 1%-ного раствора углекислого натрия (до слабокислой реакции по лакмусу), вскипятить. В результате в осадок выпадут альбумин и глобулин.

Опыт 2. Перемешать в пробирке 2-3 мл молока и 2-3 мл насыщенного раствора сернокислого аммония. В полунасыщенном растворе сернокислого аммония образуется осадок из казеиногена и глобулина. Осадок отфильтровать. К фильтрату добавить кристаллический аммоний до получения в пробирке насыщенного раствора. При этом образуется осадок молочного альбумина.

 

Контрольные вопросы

 

1. Чем объяснить, что осаждение глобулина происходит при полунасыщении раствора сернокислым аммонием, а осаждение альбумина - при полном насыщении?

2. Каким образом можно узнать, было ли молоко уже пастеризовано, т. е. нагрето до 80°С?

 

Работа № 18. Выделение альбуминов и глобулинов из белка куриного яйца (2 часа)

 

Цель занятия - изучить состав белков белковой оболочки куриного яйца.

Содержание работы. Провести разделение белков белковой оболочки яйца на альбуминовую и глобулиновую фракции, доказать присутствие белков с помощью качественной реакции на белки - биуретовой.

Подготовка к занятию. Изучить состав белков белковой оболочки яйца, охарактеризовать белки альбуминовой и глобулиновой фракций.

Литература [2. с. 487-489].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Привести названия и краткую характеристику белков глобулиновой фракции белковой оболочки яйца.

2. Перечислите и охарактеризуйте белки альбуминовой фракции белковой оболочки яйца.

3. Какой из белков яйца обладает бактерицидными свойствами?

4. В чем сущность биуретовой реакции, ее химизм?

 

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, куриный белок, бумажные и ватные фильтры. 10%-ный раствор хлористого натрия. 0,1%-ный раствор гидроксида натрия, 1%-ный раствор серно-кислой меди, фарфоровая чашка.

 

Ход работы

 

В фарфоровую чашку взять около 5 мл белка куриного яйца. Взбить его палочкой, смешать с 10-12-кратным объемом дистиллированной воды и перенести в колбу. Профильтровать раствор через ватный фильтр. В фильтрате будет находиться альбуминовая фракция белков, а на фильтре - глобулиновая.

Растворите глобулины на фильтре небольшим количеством 10%-ного раствора хлорида натрия и соберите раствор в отдельную пробирку.

Проделайте с обоими растворами белков биуретовую реакцию. Для этого к 2 мл каждого фильтрата прибавьте 1-2 мл раствора гидроксида натрия и взболтайте. Добавьте 1-2 капли раствора сернокис­лой меди. Встряхните и следите за окраской. (Избыток сульфата меди может замаскировать реакцию голубым раствором гидроксида меди.)

 

Контрольные вопросы

 

1. На чем основано фракционирование белков белковой оболоч­ки яйца?

 

Работа № 19. Щелочной гидролиз белка (2 часа)

 

Цель занятия - изучить качественные реакции на серосодержа­щие аминокислоты и наличие их в белках куриного яйца и кератине волос.

Содержание работы. Провести реакцию Фоля на белок курино­го яйца и кератин волос.

Подготовка к занятию. Изучить качественные реакции на серо­содержащие аминокислоты, вспомнить из органической химии ос­новные серосодержащие аминокислоты, качественные реакции на общий белок, условия гидролиза белков.

Литература [2, с. 139-143; 4, с. 73; 7, с. 113-114].

 

Вопросы для самоконтроля

 

1. Напишите структурные формулы серосодержащих аминокис­лот.

2. Перечислите качественные реакции на белки, на серосодержа­щие аминокислоты.

3. Напишите реакцию Фоля с цистеином.

4. Напишите реакцию гидролиза дипептида.

5. Какие серосодержащие аминокислоты входят в состав склеропротеина (кератина) волос?

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, спиртовка, 10%-ный раствор гидроксида натрия, 1%-ный раствор сернокислой меди, 0,5%-ный раствор уксуснокислого свинца.

 

Ход работы

 

Опыт 1. Реакция Фоля на серосодержащие аминокислоты. В про­бирку налить 1-2 мл уксуснокислого свинца и по каплям добавлять раствор едкого натра до растворения образовавшегося осадка гидро­ксида свинца. Затем прилить 4-5 капель белка и нагреть смесь. На­блюдать постепенное потемнение раствора.

Опыт 2. Щелочной гидролиз белка. Положить в пробирку прядку волос (лучше светлых) и залить их 2 мл 10%-ного раствора КаОН. Осторожно нагрейте пробирку на спиртовке, следя за гидролизом ке­ратина. Когда волосы исчезнут, отлейте несколько капель гидролиза-та в пробирку и добавьте 1-2 капли 1%-ного раствора сульфата меди. К оставшейся части раствора добавьте 5 капель раствора уксуснокис­лого свинца. Запишите и объясните наблюдения, схемы реакций. Сделайте вывод.

Контрольные вопросы

1. Почему при сжигании шерсти, волос ощущается запах серы?