06.03.01
___.___.20___ | |
. | - . , ., . . |
.. | |
..., ., .. |
2016
577.151.3
: . . . . 2016. 39 . , 5 ., 36 .
, , , , , , ,
. , . , , . fum1 fum2 . .
..
..
I. | |
1.1. | |
1.1.1 | |
1.1.2 | |
1.1.3 | |
1.1.4 | |
1.1.5 | |
1.2 | |
1.2.1 | |
1.2.2 | |
1.2.3 | |
1.2.4 | |
1.2.5 | |
II. | |
2.1. | |
2.2. | |
2.2.1 | |
2.2.2 | |
2.2.3 | |
2.2.4 | |
2.2.5 | |
2.2.6 | |
2.2.7 | |
2.2.8 | |
2.2.9 | |
2.2.10 | |
2.2.11 | |
III | |
3.1. | |
3.2 | |
3.3. fum1 fum2 | |
|
|
+
-
--
Rf
, , [5].
. , , , , , .
, - . , , , [34].
: , . , .
(, 4.2.1.2) - , , . 2 fum 1 fum2, . : , : , , -, [31]. , , , .
I.
1.1.
1.1.1
|
|
, , , , . , - [24].
, , . . , , , : . , , [22].
, , . , [25].
1.1.2
. , . , , .
, . , , . , [21].
1.1.3
, . , , - m [23].
. . , (NO3) , [27]. , - . , , , , - (PIMAC), [28].
1.1.4
, [14]. ( ), NADH NAD+ , , [11].
|
|
(Reena Narsai et.al 2011), , . , . , , ( ), , , , . , , Arabidopsis: [14].
, ( ) - , [12]. , , , NAD + . , , , . , , , , [19]. , , .
, , . , . pH c 7,5 6,8-7,2 . 7,2, . , , , , 7. , , , () , [12].
, . , 2-, . , 2- 2- - NAD+. NAD+, , , , . , , Selenastrum Minutum (Vanlerberghe ., 1989) - (Tronconi et al., 2008), , , [14].
|
|
, . , (Vanlerberghe , 1989; 1990;. Vanlerberghe & Turpin, 1990), O2, , . , O2. , , , , - . , Menegus . (1989) , , [19].
, , . , .
1.1.5.
, . , , [Gupta et al. 2012]. , NO , .
, , , , .
, , , , . , , , [33].
1.2.
1.2.1
- , , , . , , , , , , [15].
L- [2]. : I , II [35].
II ; - , , . II E.coli Corynebacterium, -- .
pH 7,0-9,0, -, [29].
1.2.2
. , 48,5 466 . , 96% , .. , - - [30].
|
|
Raghavendra A.S. 1994 Interdependence of photosynthesis and respiration in plant cells: interactions between chloroplasts and mitochondria . coli. : . -100, -139, -140, -141 b-, -187, - 188 d-, -324, -326 -. , , , -98, -100, -141 b- -188 d-. ( ), , (b-), -126, -129, -131, -132. . , , , - . , , [30].
12 , 3 . , . , , , [16,17]
1.2.3
Arabidopsis : FUM1 (At2g47510) FUM2 (At5g50950). , 95% , N- . , 1 , FUM1 FUM2 25 32 () , 23 . , [10]. , FUM1, , , . FUM2, Arabidopsis, [36]. FUM2 , , , [10].
, , , . , , . in vitro : , N- ; , , [29].
1.2.4
, , , [36]. , , , [32]. , , , , . -.
: , N- . (). (TIM). , [36].
S. Cerevisiae - . , , , , , . , , , , [9].
1.2.5
, . , , , , [26].
, , . , pH, Zea mays (6,5) ( 5 ) ( 7,0, 50 ) [18].
, , 2-. , A. thaliana A, AM, , .
, : Mg2+ . , , H3- , 4-. , , , , H3- , 4- Mg2+.
, , , SO42-, Cl- [20].
II.
2.1
.
, :
1. ;
2. 3, 6 24 ;
3. ;
4. fum1 fum2 .
2.2. .
2.2.1. .
10-12- (Zea mays L.) 76, 25 12- .
2.2.2.
10-12 . 24 - 5 , , .
17 3/ . 2 0,5 %, , .
2.2.3.
2000 240 . . . [7]
150-200 1:5 0,05. pH 7.4, 5 5 MgSO4 5 , 5000 / eppendorf Centrifuge 5804 R. .
0,05 7,4 3 . 3 . , 10 . 240 . :
ΔD 240 , ε , V (), V (), t ().
4.
2.2.4
, . - Helicon VE-10. 4% , 7% . , 3/. 2. 0,1% . 0, 025 -HCl 0,192 8,3.
2 : 19 , 6 25 . [7]
2.2.5
50 -HCl 7,4, 20 , 3 NAD+, 1 , FMS. , 37 , 7% . . [7]
2.2.6
--- [13]. 150-200 , 5 3000/. 1V -- 25:24:1. 10 ., 5. 10000 /., 4. , 3V 96% 1 . 30 . -20. 10 . 12000 /., , , 50. .
2.2.7
1% Helicon (). 50´ -, . , 1 ( 8,5). 5 . 40 . 70.
312 . - DNA Analyzer (-, ) Gel Explorer 1.0.
2.2.8
http:// www.molbiol.edu.ru/protocol/10_01.html 2000 260 320 . 0,09% , 5 . (D260/320) , .
2.2.9
MMLV Reverse Transcriptase. 1-6 . (0,5-2) 1-3 . -dT , , , 9 ., 2 . 70, 4 . 5´ ,4 . 10 dNTP, 2 DTT 20 . 37 30 .
2.2.10
RT- Bio-Rad DNA Engine Thermal Cycler Chromo 4 (Bio-Rad, ), , - SYBR Green. , Primer3, :
fum 1:
5 -gattacttcgatcattgaggt-3
5 -accagaactcgcggatgtggc-3 fum 2: 5-acaaacttgccattcgtcacc-3; 5-tggttcattctcaggcagaga-3: 95 5 ., : 95 30 ., 60 30 ., 72 30 . (), - 72 10 . ef-1α - . .
2-ΔΔCt- Opticon MonitorTM Software (Biorad, ).
2.2.11
3-4 , . , . . < 0,05 [4].
III .
3.1.
, , . - - , . 21%, . , , , [1].
, , . 3 . 15,54 /... 6 16, 13 /..., 16,1 /... , , , .
: . . 1. , 24 .
. .
, 3 26,3 /..., 6 12,28 /... 24 CO2 7,75 /... , .
, , [8].
, , [12]. , CO2 , . [6]. , , , . , , , [3].
, , . -, , , .
: (), (), (-6-) ( ) , . , , , , [1].
. . 13,7 /... 15,3 /... , 24 8,67 /.... , , .
, , , . , , , . , - NO , NADH, NO [23].
, . , (Vanlerberghe , 1989; 1990;. Vanlerberghe & Turpin, 1990), O2, .
, , . , 6 .
24 . ( 2). - [18].
. 2. . 1- 2, 2- N2, 3- . 1, 2 , F
, . , R f=0,51 , R f=0,41 . . , , , L-, , . , , , (), , [18].
, , .