Групповую (относительную),

Стереоспецифичность,

редко двойственную специфичность.

Стереоспецифичность – катализ только одного из стереоизомеров, например:

• специфичность к L- или D-аминокислотам – например, почти все ферменты человека взаимодействуют с L-аминокислотами,
• ферменты метаболизма углеводов имеют специфичность к D-, а не к L-моносахаридам,
• специфичность к цис- и транс-изомерам. Например, аспартаза реагирует только с транс-изомером – фумаровой кислотой, но не с малеатом (цис-изомер).

Стереоспецифичность аспартазы к транс-изомеру субстрата

 

Реакция расщепления мочевины

2. Абсолютная специфичность – катализ только одного вещества. Например, расщепление мочевины уреазой; аргиназа катализирует расщепление аргинина на орнитин и мочевину.

3. Групповая специфичность – катализ субстратов с общими структурными особенностями, т.е. при наличии определенной связи или химической группы:

• пепсин катализирует разрыв пептидной связи, образованной карбоксильными группами ароматических аминокислот (тромбин расщепляет пептидную связь только между аргинином и глицином).
• например, наличие ОН-группы: алкогольдегидрогеназа окисляет до альдегидов одноатомные спирты (этанол, метанол, пропанол).
• Гексокиназа катализирует присоединение фосфатной группы к ряду шестиуглеродных сахаров: глюкозе, маннозе, фруктозе, галактозе и др.

4. Двойственная специфичность – фермент взаимодействует с резко различающимися по структуре субстратами. Например, ксантиноксидаза окисляет не только гипоксантин и ксантин, но и альдегиды.

Механизмы катализа

1. Кислотно-основной катализ. 2. Ковалентный катализ

Доноры	Акцепторы
-СООН -NH3+ -SH	-СОО- -NH2 -S-

1. Кислотно-основной катализ – в активном центре фермента находятся группы специфичных аминокислотных остатков, которые являются хорошими донорами или акцепторами протонов. Такие группы представляют собой мощные катализаторы многих органических реакций.

С₂Н₅ОН + NAD⁺ → СН₃-СОН + NADH + H⁺

 

Механизм кислотно-основного катализа на примере алкогольдегидрогеназы печени. I - молекула этилового спирта имеет центр связывания, обеспечивающий гидрофобное взаимодействие активного центра и метильной группы спирта; II - положительно заряженный атом цинка способствует отщеплению протона от спиртовой группы этанола с образованием отрицательно заряженного атома кислорода. Отрицательный заряд перераспределяется между атомом кислорода и соседним атомом водорода, который затем в виде гидритиона переносится на четвёртый углеродный атом никотинамида кофермента NAD+; III - в результате формируется восстановленная форма NADH и уксусный альдегид.

2. Ковалентный катализ – наиболее показателен и лучше изучен - ферменты реагируют со своими субстратами, образуя при помощи ковалентных связей очень нестабильные фермент-субстратные комплексы, из которых в ходе внутримолекулярных перестроек образуются продукты реакции.

Нуклеофильный механизм (воздействующий на «+»), т.е. в активном центре фермента находятся активные отрицательно заряженные группировки, например: R-COO^- (в Glu, Asp), R-OH (Ser), R-SH (Cys). Они влияют на положительные заряды субстрата, атакуют его, делают неустойчивым, поляризуют.

Электрофильный механизм - в активном центре фермента находятся положительные группы, чаще Mg²⁺, Mn²⁺, NH₄⁺. Эти группы воздействуют на электроны в субстрате, дестабилизируют его, превращают в продукт.

Действие сериновых протеаз, таких как трипсин, химотрипсин и тромбин - ковалентная связь образуется между субстратом и аминокислотным остатком серина активного центра фермента. Термин "сериновые протеазы" связан с тем, что аминокислотный остаток серина входит в состав активного центра всех этих ферментов и участвует непосредственно в катализе. Механизм ковалентного катализа на примере химотрипсина, осуществляющего гидролиз пептидных связей при переваривании белков в двенадцатиперстной кишке. Субстратами химотрипсина служат пептиды, содержащие аминокислоты с ароматическими и циклическими гидрофобными радикалами (Фен, Тир, Три), что указывает на участие гидрофобных сил в формировании фермент-субстратного комплекса. Радикалы Асп₁₀₂, Гис₅₇ и Сер₁₉₅ участвуют непосредственно в акте катализа. Вследствие нуклеофильной атаки пептидной связи субстрата происходит разрыв этой связи с образованием ковалентно-модифицированного серина - ацил-химотрипсина. Другой пептидный фрагмент высвобождается в результате разрыва водородной связи между пептидным фрагментом и Гис₅₇ активного центра химотрипсина. Заключительный этап гидролиза пептидной связи белков - деацилирование химотрипсина в присутствии молекулы воды с высвобождением второго фрагмента гидролизуемого белка и исходной формы фермента.