Характеристика заболевания. Гарднереллы вызывают поражение урогенитального тракта в виде бактериального вагиноза, при котором резко уменьшается количество лактобактерий

Гарднереллы вызывают поражение урогенитального тракта в виде бактериального вагиноза, при котором резко уменьшается количество лактобактерий, т.е. изменяется экосистема влагалища, повышается рН среды, что способствует накоплению патогенных микроорганизмов.

Клинические проявления зависят от изменений экосистемы влагалища. Доминирующая флора рода Lactobacillus заменяется другой флорой – Gardnerella vaginalis. Развитию этого заболевания способствуют 2 группы факторов:

– эндогенные: изменение гормонального статуса, снижение иммунологической реактивности, нарушение микробного биоценоза кишечника;

– экзогенные: предшествующая длительная антибактериальная терапия, перенесенные ранее воспалительные заболевания мочеполовой системы, применение иммунодепрессантов и гормональных препаратов.

Источник инфекции – больной человек; путь передачи – половой.

Входные ворота – слизистые оболочки влагалища.

Патогенез

Вышеуказанные факторы вирулентности приводят к уменьшению или полному исчезновению физиологических лактобактерий, уменьшается количество молочной кислоты, повышается рН влагалищной среды, что благоприятствует накоплению другой флоры, в частности Gardnerella vaginalis, которая и вызывает различные клинические формы бактериального вагиноза – гарднереллеза, при котором появляется зуд, жжение, выделения с рыбным запахом за счет образования аномальных аминов. Это заболевание часто сопутствует кандидозному и трихомонадному вагиниту.

При гарднереллезе верхних половых путей возбудитель проникает в матку, трубы, яичники. Развиваются воспалительные поражения, которые могут распространяться даже на брюшину.

Может быть гарднереллез мочевых путей. При этом возникает геморрагический цистит, пиелонефрит.

Чаще гарднереллезом болеют женщины, если болеют мужчины, у них также поражается мочеполовая система.

Клиническая картина

Лабораторная диагностика

Бактериоскопический метод. Исследуют отделяемое или соскоб из пораженного участка. Окрашивают мазок по Граму и выявляют «ключевые» клетки. Это плоские эпителиальные клетки, к краям которых прикрепляются грамотрицательные и грамположительные бактерии. В мазках обнаруживается мало лейкоцитов. Проводят выявление аномальных аминов – продуктов симбиоза гарднерелл и влагалищных анаэробов. К капле выделений добавляют каплю 5-10% КОН – соли аномальных аминов превращаются в летучие основания со специфическим запахом рыбы (аминовый тест). Для выявления антигенов в исследуемом материале используют РИФ, ИФА или РИА, ПЦР для генодиагностики

Лечение

Пенициллин, линкомицин, метронидазол, клиндамицин, иммуностимуляторы, витамины, препараты для восстановления биоценоза влагалища: лактобактерин, бифидобактерин (их применяют местно).

Профилактика только неспецифическая.

Бордетеллы

Впервые бордетеллы выделены в 1906 г. французскими микробиологами Ж. Борде и О. Жангу.

Классификация

Возбудители относятся к семейству Alcaligenaceae, роду Bordetella. В настоящее время род включает 9 видов бордетелл. Патологию у человека вызывают 3 вида бактерий: В. pertussis – возбудитель коклюша, В. parapertusis – паракоклюша; В. bronchiseptica является возбудителем болезней животных, у человека весьма редко вызывает респираторные инфекции (оппортунистический патоген).

Данные виды обладают более чем 90% гомологией ДНК, однако традиционно они разделяются в связи со значительными отличиями бактерий по патогенности.

Морфология

Очень мелкие овоидной формы, грамотрицательные палочки (коккобактерии).

Не имеют спор, жгутиков (кроме B. bronchiseptica). Возбудители коклюша имеют капсулу. При окраске толуидиновым синим выявляются метахроматические биполярные гранулы.

Культуральные свойства

Требовательны к питательным средам. Нуждаются в факторах роста. В среды добавляют аминокислоты (цистеин, метионин), никотиновую кислоту, кровь, а также ионообменные смолы или уголь.

Уголь, кровь, ионообменные смолы добавляют в среды для адсорбции жирных кислот, которые образуются в процессе роста бордетелл и подавляют их размножение.

Лучшими средами являются глицерино-картофельно-кровяной агар (среда Борде-Жангу); КУА (казеиново-угольный агар). На этих средах возбудитель коклюша образует колонии в виде капелек ртути, паракоклюша – коричневые колонии.

Время культивирования – 48-72 часа.

При росте возбудители коклюша диссоциируют на 4 типа:

I – вирулентные бордетеллы, S -формы, имеют пили; II и III – RS-формы (переходные); IV – авирулентные R-формы, пили отсутствуют.

Биохимические свойства

Биохимическая активность не выражена.

Строгие аэробы, каталазоположительны.

Белки и углеводы не разлагают.

Антигенная структура

Имеется 14 вариантов О-антигена клеточной стенки, для всего рода характерен антиген 7, для возбудителя коклюша дополнительно специфический антиген – 1, для возбудителя паракоклюша – 14, для B. bronchiseptica – 12. Их выявляют в реакции агглютинации с монорецепторными сыворотками.

Факторы патогенности

Синтез и продукция большинства факторов патогенности находится под контролем генов вирулентности бордетелл (bvgA и bvgS), которые образуют генетический bvg-регулон.

Возбудители коклюша обладают набором факторов адгезии, определяющих их тропизм к эпителию верхних дыхательных путей. Ведущим является филаментозный гемагглютинин, который связывается с интегриновыми рецепторами мерцательного эпителия трахеи. Бактерии имеют многочисленные фимбрии.

В. pertussis продуцирует ряд токсинов.

Коклюшный токсин представляет собой термостабильный белок. Он состоит из А и В субъединиц. Компонент В связывается с мембраной эукариотических клеток, обеспечивая поступление токсина в клетки.

Компонент А обладает АДФ-рибозилазной активностью, вызывая рибозилирование некоторых G-белков-ГТФаз. Их инактивация нарушает внутриклеточную регуляцию с повышением концентрации цАМФ. Действие токсина на ткани приводит к увеличению их чувствительности к гистамину, стимулирует лимфоцитоз, усиливает секрецию инсулина.

Имеется дермонекротический токсин, который также взаимодействует с внутриклеточными ГТФазами и может вызывать некроз и гибель клеток.

Трахеальный цитотоксин имеет небелковую природу и представляет собой продукт трансформации муреина. Активирует макрофаги с выделением провоспалительных цитокинов. Воспаление приводит к повреждению эпителиального слоя.

Аденилатциклаза повышает концентрацию цАМФ в различных клетках, включая макрофаги и нейтрофилы, что подавляет их активность. Также обладает гемагглютинирующим действием.

Эндотоксин (ЛПС) стимулирует воспаление.

Капсула В. pertussis предохраняет от фагоцитоза и участвует в адгезии.

Резистентность

Бордетеллы – весьма чувствительные микроорганизмы, быстро погибают под действием солнечных лучей или при повышении температуры. Не проявляют устойчивости к основным антисептикам и дезинфектантам.

Патогенез и характеристика заболевания

В. pertussis вызывает коклюш – острое антропонозное респираторное инфекционное заболевание, которое характеризуется циклическим течением и приступообразным спастическим кашлем.

В. parapertusis вызывают паракоклюш – заболевание, сходное по клинике с коклюшной инфекцией, но с более легким течением.

Возбудитель коклюша весьма контагиозен. При контакте с источником инфекции вероятность непривитых лиц заболеть превышает 70%. Болеют преимущественно дети.

Источник инфекции – больной ребенок и бактерионоситель. Путь передачи – воздушно-капельный.

Инкубационный период болезни составляет 1-2 недели.

Для заболевания характерны тяжелые приступы пароксизмального кашля, иногда приводящие к рвоте, ларингоспазму и кратковременной асфиксии.

Возбудитель при помощи адгезинов связывается с мерцательным эпителием трахеи и бронхов, быстро размножается на поверхности клеток и выделяет токсины. Он не способен проникать в нижележащие слои.

Развитие перибронхиального воспаления и действие токсинов приводят к повреждению эпителия, раздражению периферических нервных окончаний с возникновением приступов кашля. Механизм кашлевых пароксизмов до конца не выяснен. Они сохраняются и после элиминации бактерий. Считается, что инфекция снижает порог возбуждения периферических рецепторов трахеи и бронхов к внешним раздражителям.

Выделяют 3 периода заболевания.

Начальный катаральный период очень заразен. Сопровождается насморком, кашлем, длится около 2-х недель. Для периода судорожного кашля характерны приступы кашлевых пароксизмов, его длительность составляет 4-6 недель. В конце периода при осложненном течении могут возникать вторичные бактериальные инфекции – отиты, пневмонии. Тяжелые вторичные бронхопневмонии у детей 1 года жизни могут заканчиваться летально.

Период реконвалесценции характеризуется снижением частоты и силы пароксизмов, выздоровление наступает медленно. Общая длительность заболевания может достигать 2-3 месяцев.

Возможны более легкие формы заболевания без четкой периодизации, протекающие по типу обычных респираторных инфекций.

Иммунитет

После перенесенного заболевания или после вакцинации формируется стойкий иммунитет, который поддерживается антителами и Т-лимфоцитами. Иногда возможна повторная инфекция, которая протекает в катаральной форме.

Лабораторная диагностика

Клинический диагноз может быть установлен при выявлении типичных симптомов заболевания.

Для лабораторной диагностики инфекции материалом для исследования является слизь задней стенки носоглотки, взятая тампоном.

Бактериологический метод эффективен в катаральный период болезни (более 90% позитивного культивирования). В конце периода пароксизмального кашля выделение возбудителей не превышает 10-20%.

Для прямого посева используют метод «кашлевых пластинок». Посев производят на среду Борде-Жангу или казеиново-угольный агар.

Идентификацию возбудителя проводят по морфологическим, культуральным, биохимическим и антигенным свойствам. Выполняют реакцию агглютинации с О-сыворотками к 1, 14, 12 и 7 вариантам антигенов или используют МИФ.

Дифференцируют возбудителя коклюша от других видов бордетелл (см. табл. 12).

B. рertussis растет только на специальных средах, на казеиново-угольном агаре – в виде капелек ртути. Возбудитель имеет капсулу, дает гемолиз на кровяном агаре. Агглютинируется сывороткой к антигену 1.

B. рarapertussis не имеет капсулы. Растет на МПА в виде коричневых колоний. Выделяет уреазу. Агглютинируется антисывороткой к антигену 14.

B. bronchiseptica имеет жгутики, агглютинируется сывороткой к антигену 12. Остальные свойства как у B. parapertussis.

Таблица 12.

 

Дифференциальные признаки патогенных видов бордетелл

 

Признак	Bordetella pertussis	Bordetella parapertussis	Bordetella bronchiseptica
Жгутики	-	-	+
Капсула	+	-	-
Образование уреазы	-	+	+
Потемнение на МПА	-	+	+
Рост на среде Борде-Жангу через 24-48 ч через 72-96 ч	- +	+	+
Чувствительность к ингибиторам роста	+	-	-
Рост на простом агаре	-	+	+
Образование уреазы	-	+	+
Восстановление нитратов	-	-	+
Специфический термолабильный антиген
Сенсибилизация мышей к гистамину	+	-	-

Серологический метод имеет ограниченное значение. Выявляют антитела в парных сыворотках больного, начиная со II периода заболевания в ИФА, реакции агглютинации, РСК или РПГА. Определяют также IgG и IgA против филаментозного гемагглютина и против токсина B. рertussis.

В качестве экспресс-метода разработан ПЦР-анализ с набором праймеров к B. рertussis и B. рarapertussis.

Лечение

Основными препаратами для лечения коклюша являются антибиотики группы макролидов/азалидов (эритромицин, азитромицин). Лечение в катаральной стадии болезни ускоряет элиминацию возбудителя, сокращает заразный период и может иметь профилактический эффект. Антибиотикотерапия в период пароксизмального кашля менее эффективна, возможно уменьшение тяжести и общей продолжительности заболевания.

Профилактика

Неспецифическая профилактика включает изоляцию и лечение больных. Осуществляют введение препаратов иммуноглобулинов контактным лицам, организуют карантин на 14 дней для детей до 7 лет.

Для специфической профилактики применяют АКДС (адсорбированную коклюшно-дифтерийную столбнячную вакцину) с трехмесячного возраста 3 раза с интервалом 45 дней с ревакцинацией в 18 месяцев. Для снижения реактогенности предпочтительным является использование ацеллюлярной (бесклеточной) коклюшной вакцины (АаКДС). В состав бесклеточной вакцины, могут входить коклюшный анатоксин, филаментозный гемагглютинин, мембранный протеин пертактин, антигены микроворсинок.

Инфанрикс Тетраксим

 

 

Бруцеллы

В 1886 г. английский военный врач Д. Брюс в селезенке больного, погибшего от мальтийской лихорадки, обнаружил мелкие коккобактерии, выделил их в чистой культуре и назвал Micrococcus melitensis. В этом же году ученый Б. Банг выделил такие же коккобактерии из околоплодных вод при аборте коров. В 1887 г. А. Райт установил, что сыворотка больных мальтийской лихорадкой дает реакцию агглютинации с культурой, выделенной Брюсом. В 1914 г. Д. Траум выделил похожего возбудителя при инфекционном аборте свиней.

Классификация

В 1920 г. все эти возбудители были отнесены к одному роду, и в честь первого открывателя Д. Брюса род получил название Brucella, семейство Brucellaceae, а виды получили исходные названия, зависящие от источника инфекции:

B.melitensis – поражает мелкий рогатый скот;

B.abortus (bovis) – крупный рогатый скот;

B. suis – свиней.

B.canis – собак.

B. ovis – овец.

B.neotomаe – крыс и других грызунов.

Анализ генома бруцелл показал, что по степени гомологии ДНК все они образуют один общий вид. Однако с учетом фенотипических отличий и особенностей заболеваний вышеприведенное деление на группы сохраняется.

Патологию у человека наиболее часто вызывают первых три возбудителя.

Морфология

Бруцеллы представляют собой мелкие грамотрицательные коккобактерии, не имеют жгутиков и спор, могут образовывать капсулу при культивировании на специальных средах с добавлением иммунной сыворотки.

Культуральные свойства

Бруцеллы весьма прихотливы при культивировании. Способны расти на сложных средах с добавлением глюкозы, крови, тиамина и биотина. Рост более активный на средах с печеночным экстрактом (печеночный бульон или агар). Первые генерации размножаются очень медленно (2-4 недели), последующие – 1-2 недели.

На плотных средах бруцеллы могут диссоциировать на S и R-формы, а под действием антибиотиков могут переходить в L-формы. B.abortus в первых генерациях являются микроаэрофилами и нуждаются в повышенной концентрации углекислого газа (5-10%) при культивировании.

Биохимические свойства

Строгие аэробы. Образуют каталазу, часть штаммов – оксидазу.

Разлагают глюкозу и некоторые другие углеводы до кислоты, гидролизуют белки до аминокислот, а B.abortus – до сероводорода. Обладают уреазой.

Выделяют ферменты липазу, фосфатазу, гиалуронидазу.

С учетом ферментативной активности, чувствительности к фуксину и тиамину, лизабельности фагом Т-6 и способности агглютинироваться монорецепторными сыворотками бруцеллы подразделяются на биовары. B. melitensis имеет 3 биовара, B. abortus – 8, B.suis – 4.

Антигенные свойства

Бруцеллы имеют два термостабильных соматических антигена А и М. Количество их варьирует у разных видов бруцелл. М-АГ обнаруживается преимущественно у B. melitensis, А – у B. abortus.

Имеется G-антиген – полисахаридный, общий для всех бруцелл. Есть еще L-антиген – поверхностный термолабильный, сходен с Vi-антигеном у сальмонелл. У R-форм бруцелл имеется R-антиген. Его определяют специфическими антисыворотками при серотипировании бруцелл.

Факторы патогенности

Бруцеллы обладают редким для бактерий вариантом генома, состоящим из 2 кольцевидных хромосом. Плазмид не обнаружено. Несмотря на явную патогенность возбудителей для животных и человека, при анализе генома не выявлено генетических островов патогенности.

Отсюда основными факторами вирулентности являются компоненты бруцелл, обеспечивающие их выживание в фагоцитах и распространение по организму.

Капсула бруцелл предохраняет от фагоцитоза.

ЛПС- эндотоксин возбудителей менее биологически активен в сравнении с эндотоксином энтеробактерий. Тем самым бруцеллы не вызывают усиленной продукции провоспалительных цитокинов, что увеличивает их выживаемость.

Ферменты бактерий гиалуронидаза, липаза ускоряют инвазию возбудителей.

Низкомолекулярные продукты бруцелл ингибируют фагосомо-лизосомальное слияние, что способствует незавершенному фагоцитозу.

Резистентность

Устойчивы к низким температурам, долго сохраняются в почве, навозе (4-5 месяцев), в шерсти овец (3-4 месяца). В замороженных мясных продуктах сохраняют жизнеспособность до 5 месяцев. К высоким температурам, дезинфицирующим растворам и УФ-лучам бруцеллы очень чувствительны, что используется для неспецифической профилактики бруцеллеза.