Оценка состояние мембран эритроцитов

Популяция эритроцитов, циркулирующая в кровилабораторных крыс, была неоднородна по устойчивости к гипотоническим растворам хлорида натрия. До интоксикации и в ходе токсикоза мы их разделили на 3фракций по выраженности степени гемолиза в зависимости от концентрации гипотонических растворов хлорида натрия. Первая фракция была представлена клетками, которые разрушались в интервале 0,80-0,50% растворов хлорида натрия, то есть обладали минимальной осмотической устойчивостью. До интоксикации общая сумма степени гемолиза (ΣСГ) данных эритроцитов составила 19,46-20,31%, она была представлена старыми эритроцитами, находящимися в состоянии разрушения и деформации формы [21 с. 687-692]. Вторая фракция была представлена клетками, лизис которых происходил в интервале 0,50-0,35%-ных растворов хлорида натрия. Общая процентная доля СГ клеток была равна 62,13-63,15%, в неё входили зрелые эритроциты, обладающие оптимальным уровнем резистентности к гипотоническим растворам NaCl. Третью фракции составляли клетки, которые разрушались в растворах соли с концентрацией менее 0,35%. Они характеризовались максимальной осмотической резистентностью, так как были представлены молодыми клетками (табл. 3).

Через сутки токсикоза увеличивалась содержание I фракции эритроцитов, по сравнению с контролем, в 1,31 раза и уменьшалось III фракции в 1,40 раза на фоне сохранения количества клеток II фракции. Значит, острое воздействие свинца способствовало увеличению в крови крыс процентной доли старых клеток за счёт прямого влияния ионов свинца, инициирующих трансформацию их клеточной мембраны [9, c. 32-34; 21 с. 687-692], и уменьшения уровня молодых в результате снижения скорости созревания эритроидных клеток в органах кроветворения.

Таблица 3 – ОРЭ по степени гемолиза (%) (n=5), Х±Sx

Показатель	Группа	До токсикоза	Длительность токсикоза, сут.
			1	15	30
I фракция 0,80≥ΣСГ≥0,50	I	20,31±0,36	20,58±0,18*	19,99±0,23	21,04±0,19
	II	19,46±0,28	26,95±0,12*	27,03±0,15*	29,16±0,27*
II фракция 0,50>ΣСГ≥0,35	I	62,13±1,46	61,13±0,56	62,55±0,37	60,87±0,71
	II	63,15±0,78	60,02±0,41	53,97±0,34*	50,48±0,21*
III фракция 0,35>ΣСГ>0,00	I	17,56±0,41	18,29±0,27	17,46±0,32	18,09±0,30
	II	17,39±0,28	13,03±0,18*	19,00±0,23	20,36±0,13

Примечание: * - р< 0,05 по отношению к I группе

Через 15 и 30 суток экспериментальной свтнцовой интоксикации в популяции эритроцитов крыс наблюдался рост количества низко резистентных клеток по отношению к гипотоническим растворам хлорида натрия. Их число увеличивалось по сравнению с контролем в 1,35-1,39 раз (табл. 3). В тоже время отмечался прирост и количества высоко устойчивых эритроцитов в 1,13-1,14 раза, хотя и не достоверный. Следовательно, воздействие свинца сокращало время жизни эритроцитов в кровеносном русле, что отражалось на количестве старых клеток, и угнетало процессы эритропоэза, инициируя выброс в кровоток молодых эритроцитов. В совокупности, данные факторы определяли уровень зрелых эритроцитов в кровеносном русле и, соответственно, газотранспортные свойства крови.

Таким образом, свинцовая интоксикация сопровождается увеличение в крови количества низко и высоко резистентных эритроцитов по отношению к гипотоническим растворам хлорида натрия, по сравнению с контролем, в 1,35-1,39 и 1,13-1,14 раза за счёт прямого и опосредованного действия металла, что сокращает уровень зрелых клеток в 1,16-1,21 раза.

 

Заключение

Производственная практика по получению профессиональных умений и опыта профессиональной деятельности проводилась на базе кафедры естественнонаучных дисциплин Института ветеринарной медицины ФГБУ ВО «Южно-Уральский государственный аграрный университет» с 23 июля по 3 сентября 2018 года.

Продолжительность производственной практики по получению профессиональных умений и опыта профессиональной деятельности составила 6 недель (216 часа, 6 зачетных единиц).

При проведении лабораторных исследований, статистической обработки экспериментальных данных, были сделаны следующие выводы.

Проблема загрязнения объектов окружающей среды токсичными соединениями является одной из актуальных в настоящее время, так как развитие промышленности сопряжено с ростом числа источников их поступления [7, с. 6-12]. Одним из самых распространенных промышленных загрязнителей является свинец (Pb), входящий в группу веществ первого класса опасности [3, с. 10-13]. При его попадании в экологические среды он включается в состав пищевых цепей, что отражается на состоянии здоровья не только животных, но и человека.

Свинец относится к химическим соединениям, чрезвычайно опасным для здоровья животных, так как он способен накапливаться в органах мишенях, не подвергаясь в течение длительного времени биотрансформации, и оказывая при этом влияние практически на все процессы жизнедеятельности [12, с. 25-35].

Исследования проводились на крысах-самцах линии Wistar, масса тела которых колебалась в интервале 200-230 г. На базе вивария Института ветеринарной медицины ФГБОУ ВО Южно-Уральский ГАУ было сформировано две группы, по 20 особей в каждой. Первая группа – контрольная, содержалась в стандартных условиях вивария. Вторая группа – опытная, крысам ежесуточно добавляли в воду ацетат свинца в дозе 1/10 ЛД50 в пересчете на чистый металл в течение 1-го месяца.

При определении основных гематологических показателей (эритроциты, гемоглобин, гематокрит, СОЭ) было выявлено, что поступление свинца в организм лабораторных крыс в суточной дозе 1/10 ЛД₅₀ (в пересчете на Pb²⁺) в течение 1-го месяца сопровождается уменьшением количества эритроцитов в кровеносном русле на 19,62%. Убыль концентрации красных клеток происходит на фоне прироста уровня гемоглобина в крови (на 12,90%), величины гематокрита (на 10,48%) и СОЭ (2,26 раза), что свидетельствует об увеличении размера эритроцитов и снижении их кинетической устойчивости.

В ходе экспериментального свинцового токсикоза изменяется возрастное соотношение клеток в популяции эритроцитов. Во-первых, увеличивается количество пониженностойких и среднестойких клеток, по сравнению с контролем, в 1,46-1,84 раза, а за счёт этого смещается пик гемолиза влево. Во-вторых, уменьшается уровень повышенностойких эритроцитов в 1,66-1,91 раза.

В ходе эксперимента (оценки состояния мембран эритроцитов путем определения осмотической резистентности) было выявлено, что свинцовая интоксикация сопровождается увеличение в крови количества низко и высоко резистентных эритроцитов по отношению к гипотоническим растворам хлорида натрия, по сравнению с контролем, в 1,35-1,39 и 1,13-1,14 раза за счёт прямого и опосредованного действия металла, что сокращает уровень зрелых клеток в 1,16-1,21 раза.

 

Список используемой литературы

1. Устав Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Южно-Уральский государственный аграрный университет» утвержденный, утвержденный приказом Министерства сельского хозяйства Российской Федерации от 26 июля 2015 года № 68-у. (в ред. приказа Министерства сельского хозяйства Российской Федерации от 22 февраля 2018 года №257-у)

2. Приказ Южно-Уральского государственного аграрного университета утверждена от 15.02.2018 № 38 «Структура Южно-Уральского государственного аграрного университета утверждена»

3. Бурак, Ж.М. Воздействие свинцовой интоксикации на человека и животных, влияние на развитие и функции зубочелюстной системы (обзор литературы) /Ж.М. Бурак, В.В. Сукала, Т.Н. Терехова // Медицинский журнал. - 2005. - № 4. - С. 10-13.

4. Гундина, Ю.А. Роль кислородтранспортной функции крови в процессах роста птиц / Ю.А. Гундина, М.А. Дерхо М.А. // Синтез науки и общества в решении глобальных проблем современности: сб. ст. по итогам межд. науч.-практ. конф. – Стерлитамак, 2017. – Ч. 4. – С. 10-13.

5. Дерхо, М.А. Активность ферментов эритроцитов как индикатор адап-тивности телят к условиям существования // Scientific Discoveries: Proceed-ings of articles II International Scientific Conference. Czech Republic, Kar-lovy Vary: Skleněnэ Můstek – Russia, Kirov: MCNIP, 2017. С. 15-23.

6. Дерхо, М.А. Некоторые гематологические параметры мышей на фоне кадмиевой интоксикации / М.А. Дерхо, Е.А. Ткаченко, Л.Ф. Мальцева // Наука (спецвыпуск). – 2013. – С.141-144.

7. Дерхо, М.А. Осмотическая резистентность эритроцитов периферической крови молочных телят / М.А. Дерхо, Л.С. Трофимова // Инновационно- технологическое развитие науки: сб. ст. межд. науч.-практ. конф.– Уфа, 2017. – Ч.3. – С. 40-42.

8. Дерхо, М.А. Особенности депонирования кадмия в организме птиц при экспериментальной интоксикации / М.А. Дерхо // Образование и наука в современных реалиях: материалы II Междунар. науч.–практ. конф. – Чебоксары, 2017. – [Электронный ресурс]. - Режим доступа https://interactive-plus.ru/ru /article /465351/discussion_platform (дата обращения 12.11.2017).

9. Дерхо, М.А. Оценка осмотической устойчивости эритроцитов животных при кадмиевом токсикозе // Инновационная наука как основа развития современного государства: сб. научных ст. по итогам межд. науч.-практ. конф. – Санкт-Перербург, 2017. – С. 32- 34.

10. Дерхо, М.А. Параметры эритроцитов как показатель устойчивости организма животных к вибрационному стрессу / М.А. Дерхо // Закономерности и тенденции инновационного развития общества: сб. ст. межд. науч.- практ. конф. Уфа, 2017. - Ч.3. – С. 17-19.

11. Дерхо, М.А. Реакция системы СОД-каталаза эритроцитов крыс при действии вибрационного стресс-фактора / М.А. Дерхо // Инновационно-технологическое развитие науки: сб. ст. межд. науч.-практ. конф. – Уфа, 2017. – Ч. 3. – С. 42-45.

12. Дерхо, М.А. Реакция эритроцитов в организме животных при действии ацетата свинца / М.А. Дерхо, А.В. Баранникова // Evolutio. Естественные науки. – 2017. – №11. – С. 25-35.

13. Дерхо, М.А. Характеристика влияния факторов природной среды на активность органов лейкопоэза в организме бычков / М.А. Дерхо, П.А. Соцкий // Аграрный вестник Урала. – 2010. – № 4 (70). – С. 86-88.

14. Дерхо, М.А. Характеристика резистентности эритроцитов животных в условиях техногенной провинции // Scientific research – 2017: Proceedings of articles the III International scientific conference. – Киров: МЦНИП, 2017. - С. 16-28.

15. Катаева, В.О. Исследования кислотной резистентности эритроцитов при патологических состояниях / В.О. Катаева, Ф.А. Гершкорон // Научное сообщество студентов XXI столетия. Естественные науки: эектр. сб. ст. о материалам XIII студ. межд. науч.-пакт. конф. – Новосибирск: Изд. «СибАК», 2013. – № 7 (10). – 69-72.

16. Колмогорова, Е.В. Влияние циано- и тетразольных производных цитозина и тимина на резистентность эритроцитов [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.bestreferat.ru/referat-34171.html (дата обращения 11.01.18).

17. Комусова, О.И. Влияние ацетата свинца на кору головного мозга и кровь при введении антиоксидантов: дис. … канд. биол. наук: 06.02. – Саранск: Мордовский ГПУ им. М.Е. Евсевьева, 2017. – 175 с.

18. Кропачев, Д.В. Действие биологически активных препаратов фагостим и поливедрим при интоксикации птицы свинцом и кадмием: автореф. дис. канд. биол. наук: 03.00.16; 06.02.04. – Новосибирск: НГАУ, 2004. – 22 с.

19. Нигматуллина, А.А. Сравнительная оценка влияния in vitro и in vivo наночастиц диоксида титана на резистентность мембран эритроцитов / А.А. Нигматуллина, Д.М. Нигматуллина // В мире науки и инноваций: сб. ст. межд. науч.-практ. конф. – Уфа, 2016. – Ч. 3. – С. 31-34.

20. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica. – Москва: Медифсфера, 2002. – 312 с.

21. Рыбьянова, Ж.С. Особенности морфологии эритроцитов в организме телят в условиях техногенной провинции / Ж.С. Рыбьянова, М.А. Дерхо // АПК России. – 2017. – Т. 24. - № 3. – С. 687-692. (9)Рыбьянова, Ж.С. Особенности морфологии эритроцитов в организме телят в условиях техногенной провинции / Ж.С. Рыбьянова, М.А. Дерхо // АПК России. – 2017. – Т. 24. - № 3. – С. 687-692.

22. Садчиков, Д.В. Эффективность кислородтранспортной функции крови в зависимости от качественного состояния эритроцитов при тяжелой постгеморрагической анемии /Д.В. Садчиков, АО. Хоженко // Вестн. анестезиологии и реаниматологии. – 2012. – Т. 9, № 1. – С. 35-39.

23. Соцкий, П.А. Изучение воздействия тяжелых металлов на гематологические показатели крови / П.А. Соцкий, М.А. Дерхо // Ветеринарный врач. – 2009. – № 4. – С. 5-8.

24. Терсков, И.А., Гительзон И.И. Метод химических (кислотных) эритрограмм // Биофизика. – 1957. - № 5. – С. 259-265.

25. Шеметова, А.А. Влияние возраста на осмотическую резистентность эритроцитов коров / А.А. Шеметова, М.А. Дерхо // Новая наука: история становления, современное состояние, перспективы развития: сб. ст. межд. науч.-практ. конф. – Уфа, 2017. – Ч.1. – С. 19-21.