SSCP (Single-stand conformation polymorphism) - , () .
, (. 32).
SSCP-:
1) .
2) .
3) - 7% .
4) .
5) 8 (10)% .
32. SSCP-, .
1) 1.2.
2) 2.1.
3) 7% 3.
- -, ( ).
45 , 2 . 280300 , 2030 . . ( ), SSCP 4 ; ( 3) SSCP 7 .
4) (5 NaOH 0,5 ) 7 : 3 ( 5). 15 42 .
5) 3-4 ( ), 0,5% 0,5% , 8(10)% 50%- ( 5).
. SSCP-.
SSCP- 0,5 (50 10 + 950 2). 20 1 4200, 100 , 24-48 .
25 0,09% (AgNO3). 2.3.
. , 90% 200 .., 400 .. 50%.
(. sequence ) - .
: - ( ) .
|
|
- .
, .
. . . , , - dATP, dCTP, dGTP, dTTP, . , , ddNTP. ddNTP (.33).
, .
, , ddNTP, .
. ddNTP (. 34).
. 33. [, 2003].
34. [, 2012].
, . , . , . Applied Biosystems.
Chromas.
. 35 - , , .
35. SSCP .
, . , (.36).
. 36. SSCP .
, . , 960, 600. : 80%- , 5 .
|
|
. , . , ( -). .
20 :
1) ;
2) 4- dNTP;
3) 4- ddNTP;
4) Taq-;
5) MgCl2;
6) ;
7) H20.
200 960 . , 25 , : - 10 960;
- 5 500;
- 4 600.
ddNTP. 1 70% 1,5 . 4 80% , 960 2 2 .