Иммунологические методы исследования

 

Иммунологические методы исследования — диагностические методы исследования, основанные на специфическом взаимодействии антигенов и антител. Широко используются для лабораторной диагностики инфекционных и паразитарных болезней, определения групп крови, тканевых и опухолевых антигенов, видовой принадлежности белка, распознавания аллергии и аутоиммунных болезней, беременности, гормональных нарушений. Они включают серологические исследования, или серологические реакции, к которым относят обычно реакции прямого воздействия антигенов и антител сыворотки крови в лабораторных условиях.

 

Серологические реакции различаются по способности выявлять отдельные классы антител. Реакция агглютинации, например, хорошо выявляет lgM-антитела, но менее чувствительна для определения lgG-антител. Реакции связывания комплемента и гемолиза, которые требуют участия комплемента, не выявляют антитела, не присоединяющие комплемент, например lgA-антитела и lgE-антитела. В реакции нейтрализации вирусов участвуют лишь антитела, направленные против антигенных детерминант поверхности вириона, связанных с патогенностью. Чувствительность И. м. и. превосходит все другие методы исследования антигенов и антител, в частности радиоиммунный и иммуноферментный анализы позволяют улавливать присутствие белка в количествах, измеряемых в нанограммах и даже в пикограммах. С помощью И. м. и. определяют группу и проверяют безопасность крови (гепатит В и ВИЧ-инфекция). При трансплантации тканей и органов И. м. и. позволяют определять совместимость тканей и тестировать методы подавления несовместимости. В судебной медицине используют реакцию Кастеллани для определения видовой специфичности белка и реакцию агглютинации для определения группы крови.

 

Иммунологические методы широко применяют в лабораторной диагностике инфекционных болезней. Этиологию заболевания устанавливают также на основании прироста антител к возбудителю в сыворотке крови реконвалесцента по сравнению с пробой, взятой в первые дни болезни. На основе И. м. и. изучают иммунитет населения по отношению к массовым инфекциям, например к гриппу, а также оценивают эффективность профилактических прививок.

 

Развитию иммунологических методов способствовало создание моноклональных антител, продуцируемых гибридомой, полученной в результате слияния иммунокомпетентной клетки В-лимфоцита и клетки миеломы мышей. Моноклональные антитела несут только одну химически однородную популяцию антител, комплементарную специфической детерминанте антигена, что позволяет осуществлять тонкую дифференциацию белков. Развитие И. м. и. идет как по линии совершенствования реагентов (чистоты антигенов и антител), так и по линии создания автоматизированных систем постановки реакций и их инструментального учета.

 

Принципиальные лабораторные методы, применяемые в клинической иммунологии и аллергологии

1. Определение специфических антител к: — микробным антигенам;

—аутоантигенам;

—аллоантигенам;

—аллергенам;

2. Иммунохимическue:

—определение цитокинов и их растворимых рецепторов;

—определение иммуноглобулинов, их фрагментов, иммунных комплексов;

—определение продуктов иммунных эффекторных клеток и воспалительных реакций;

—определение компонентов комплемента;

—определение белков острой фазы;

—определение других белков (например, микроглобулин, неоптерин).

3. Клеточные:

—определение популяций и субпопуляций лимфоцитов;

—определение пролиферации in vitro, продукции Ig;

—определение функциональной активности популяций и субпопуляций лимфоцитов;

—определение функциональной активности макрофагов и нейтрофилов;

—определение функциональной активности мастоцитов, базофилов и эозинофилов.

4. Иммуногистологические.

5. Иммуногенетические:

—HLA-типирование (серологическое и ДНК);

—определение аллотипов белка;

—пренатальная диагностика генетически детерминированных расстройств им­мунной системы.