Лабораторная работа № 17. Дезинфекция в микробиологической лаборатории

Цель работы. Ознакомиться с методами, средствами и правилами дезинфекции.

Задание. Ознакомиться с основными методами дезинфекции и дезинфицирующими веществами.

Теоретическая часть

В естественных условиях микроорганизмы подвергаются воздействию разных по своей природе факторов внешней среды. Они могут либо стимулировать их развитие (стимулирующее действие), либо замедлять и прекращать их развитие, тормозя метаболические процессы (бактериостатическое действие), либо вызывать гибель микроорганизмов (бактерицидное действие).

В зависимости от своей природы все факторы, действующие на микроорганизмы, делятся на физические, химические и биологические. Наиболее сильное воздействие оказывают физические и химические факторы, такие как температура, влажность, осмотическое давление, ультрафиолетовые лучи, ионизирующая радиация, ультразвук, и различные химические вещества, а также рН среды. Многие из них используются для подавления жизнедеятельности микроорганизмов. Наиболее чувствительны к их воздействию вегетативные клетки, а наиболее устойчивы споры.

Многие химические вещества даже в очень небольших концентрациях оказывают на микроорганизмы бактерицидное действие. Такие вещества называются антимикробными веществами. Антимикробным действием обладают соли тяжелых металлов (в частности, соли ртути, серебра, свинца), сильные окислители (озон, йод, хлорная известь, перекись водорода и др.), органические вещества (фенол, крезол, этиловый спирт, формальдегид и др.). Некоторые из них используются для подавления роста микроорганизмов. Они называются дезинфицирующими веществами, а уничтожение патогенных микроорганизмов с их использованием – дезинфекцией.

Дезинфекция широко применяется не только в лабораториях микробиологии, но и на различных пищевых предприятиях для обработки помещений, оборудования, посуды и рук работающих. В качестве дезинфицирующих веществ наибольшее практическое применение находят различные производные хлора (таблица 4) а также фенол и его производные (1–5%-ные растворы), йод (2%-ный раствор), этиловый и изопропиловый спирт (70%-ные растворы).

Таблица 4 – Дезинфицирующие вещества

Вещество		Применение (обработка)	Приготовление растворов
Название	Концентрация, %
1	2	3	4
Хлорная известь	10 (исходный раствор)	Контейнеры для пищевых отходов	1 кг хлорной извести растворяют в 10 л воды. Настаивают 24 часа и сливают с осадка
	5	Раковины, умывальники, унитазы	Исходный раствор разбавляют в два раза (к 1 л исходного раствора добавляют 1 л воды)
	2	Оборудование и инвентарь кондитерских цехов	Исходный раствор разбавляют в пять раз (к 1 л исходного раствора добавляют 4 л воды)
	1 (рабочий раствор)	Помещения (полы, стены, двери и т.д.)	Исходный раствор разбавляют в десять раз (к 9 л воды добавляют 1 л исходного раствора)
	0,5	Оборудование	Исходный раствор разбавляют в двадцать раз (к 9,5 л воды добавляют 0,5 л исходного раствора)
	0,2	Посуда	Исходный раствор разбавляют в пятьдесят раз (к 9,8 л воды добавляют 0,2 л исходного раствора)*
Хлорамин	0,5	Помещения и оборудование	50 г хлорамина растворяют в 10 л воды
	0,2	Посуда	20 г хлорамина растворяют в 10 л воды
Гипохлорид кальция	0,1	Посуда	10 г гипохлорида растворяют в 10 л воды

Примечание: * обычно 0,2 л исходного раствора растворяют в 10 л воды.

Приготовление и использование основных дезинфицирующих веществ. Бактерицидное действие веществ, содержащих хлор, основано на том, что, будучи сильным окислителем, он изменяет окислительно-восстановительный потенциал и инактивирует ферменты, блокируя их действие. Бактерицидное действие фенола проявляется вследствие того, что он активно поступает в бактериальную клетку, и вызывает денатурацию белков цитоплазмы и ферментов, нарушая обмен веществ и вызывая гибель микроорганизмов.

Выбор дезинфицирующего вещества, его концентрация, продолжительность срока дезинфекции зависят от конкретных условий: от того, какой объект подвергается дезинфекции, степени предполагаемого микробиального загрязнения и от устойчивости обеззараживаемых микроорганизмов. 

Вопросы для обсуждения.

1 Какие химические вещества чаще всего используются для дезинфекции в микробиологической лаборатории?

 

Список рекомендуемой литературы

 

1 Авдеева, Е.Н. Ветеринарно санитарная экспертиза рыб и других гидробионтов / Е.Н. Авдеева, Н.А. Головина // Лаб. практикум: уч. пос. – СПб.: Проспект науки, 2011. – 192 с.

2 Головина, Н.А. Ихтиопатология. Уч. пос. / Н.А. Головина, Ю.А. Стрелков, В.Н. Воронин и др. / Под ред. Н.А. Головиной, О.Н. Бауера – М.: Изд-во Мир, 2003. – 448 с.

3 Головина, Н.А. Ихтиопатология. Уч. пос. / Н.А. Головина, Ю.А. Стрелков, В.Н. Воронин и др. / Под ред. Н.А. Головиной – М.: Колос, 2010. – 512 с.

4 Гусев, М.В. Микробиология: Уч. пособие / М.В. Гусев, А.А. Минеева – М.: Изд-во МГУ, 1992. – 448 с.

5 Мишанин, Ю.Ф. Ихтиопатология и ветеринарно-санитарная экспертиза рыб / Ю.Ф. Мишанин, А.Ю. Мишанин, Д.Г. Касьянов – СПб.: Лань, 2012. – 365 с.

6 Нетрусов, А.И. Экология микроорганизмов. / Учебное пособие для студентов Вузов / А.И. Нетрусов, Е.А. Бонч-Осмоловская, В.М. Горленко и др. – М.: Изд. центр «Академия», 2004. – 272 с.

7 Прозоркина, Н.В. Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии: Учебное пособие для средних специальных медицинских учебных заведений / Н.В. Прозоркина, Л.А. Рубашкина – Ростов-на-Дону: Феникс, 2002. – 416 с.

8 Сопрунова, О.Б. Учебно-методическое пособие по микробиологии / О.Б. Супрунова, Н.В. Чертов / Часть 1. – Астрахань, АГТУ, 2001. – 45 с.

9 Пономарев, С.В. Учебное пособие по дисциплине «Микробиология» / С.В. Пономарев, Ю.В. Федоровых – АГТУ. – Астрахань, 2010. – 184 с.

10 ГОСТ 17.4.4.02–84. Государственный стандарт Союза ССР. Охрана природы. Почвы. Методы отбора и подготовки проб для химического, бактериологического, гельминтологического анализа. Государственный комитет СССР по стандартам.

11 Водоотведение населенных мест, санитарная охрана водоемов. Организация Госсанэпиднадзора за обеззараживанием сточных вод. Методические указания МЦ 2.1.5.800-99.

12 Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды. Методические указания МЦК 4.2.1018-01.

13 Методические указания по санитарно-микробиологическому исследованию почвы. 19.02.1981 г. №2293.