Методика постановки САЛМтеста

  - Используют 24-часовую культуру, подозрительную на сальмонеллы со среды Эндо, агара с бриллиантовым зеленым, МасСоnkеу агара, агара с эозин-метиленовым синим (примечание: для обнаружения присутствия саль­монелл неподходящими являются среды, предназначен­ные для обнаружения продукции сероводорода - черный преципитат затрудняет учет реакции на диагностической полоске).

  - Добавляют на зону индикации полоски приблизительно 10 мкл реактива для САЛМтест.

  - При помощи инокуляционной петли втирают испытуемую культуру в зону полоски; в случае роста чистой культуры (или же достаточно друг от друга изолированных колоний на агаровой среде) можно бактериальный рост снимать с поверхности агара непосредственно зоной полоски.

  - Полоску инкубируют 10-15 минут при комнатной темпе­ратуре.

  - Параллельно ставят отрицательный контроль: добавляют реактив на зону полоски и инкубируют без нанесения бак­териальной культуры.

- По истечении указанного времени учитывают реакции под УФ-лампой с длиной волны приблизительно 360 нм. Считывание реакций необходимо выполнять в темноте, лучше всего в специальной установке, предназначенной для оценки флюоресценции (например шкаф Гансена), по­ложительная реакция проявляется возникновением синей флюоресценции в индикаторной зоне полоски.

- Штаммы с положительной реакцией подтверждают даль­нейшей идентификацией, например при помощи набора ЭНТЕРО-Скрин (время инкубации 4 часа).

  Необходимо учитывать, что массовые желудочно-кишечные заболевания молодняка животных часто протекают в форме смешанной инфекции, вызванной помимо эшерихий патогенными штаммами энтеробактерий других родов и видов семейства кишечных, а также корона- и ротавирусами, клостридиями перфрингенс, синегнойными бактериями, энтерококками и др.

 

9. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА                                                     

В нашей стране Армавирской биофабрикой выпускается поливалентная вакцина против сальмонеллеза и колибактериоза пушных зверей, которая представляет собой жидкость светло-желтого цвета с белым осадком, легко разбивающимся при встряхивании в равномерную взвесь. Вакцина содержит инактивированные антигены возбудителей сальмонеллеза и колибактериоза.

  Применяют вакцину в неблагополучных и угрожаемых по сальмонеллезу или колибактериозу зверей хозяйствах (фермах) для иммунизации только клинически здоровых животных основного стада и щенков. Самок во второй половине беременности прививать запрещается. Вакцину вводят подкожно в область внутренней поверхности бедра и за 2-3 часа до кормления. Взрослых нутрий и щенков вакцинируют в дозе 3 и 2 мл соответственно двукратно с интервалом 8-10 дней. Иммунитет у привитых наступает на 10-12 день после последнего введения вакцины и сохраняется до 6 месяцев.

Нами, из выделенных серотипов в хозяйствах Краснодарского края, была разработана инактивированная гидроокисьалюминиевая вакцина против эшерихиоза кроликов. Вакцина содержит инактивированные формалином антигены культур эшерихий, сальмонелл, стрептококков серогруппы D и энтерококковой инфекции нутрий, адсорбированные на гидрате окиси алюминия. По внешнему виду вакцина представляет собой жидкость светло-желтого или светло-коричневого цвета. При хранении на дно флакона выпадает рыхлый осадок, легко разбивающийся при встряхивании в равномерную взвесь. Данная вакцина предназначена для специфической профилактике колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий. Вакцину применяют в благополучных, неблагополучных и угрожаемых по колибактериозу, сальмонеллезу, стрептококкозу и энтерококковой инфекции нутрий хозяйствах. Вакцинируют только клинически здоровых животных. В благополучных и угрожаемых по колибактериозу, сальмонеллезу, стрептококкозу и энтерококковой инфекции нутрий хозяйствах вакцину вводят однократно внутримышечно в область бедра с 35-дневного возраста по 1 мл, а взрослым животным по 1,5 мл. В неблагополучных хозяйствах вакцину вводят внутримышечно в область бедра с 35-дневного возраста двукратно с интервалом 7-10 дней: первая вакцинация в дозе 1 мл, вторая – в дозе 1,5 мл. Вакцина прошла с положительными результатами производственные испытания в племзверосовхозе «Северинский» Тбилисского района Краснодарского края. Можно вакцинировать нутрий перед случкой, что позволяет получать молодняк с антителами против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий, затем такой молодняк вакцинируют с 2-х месячного возраста согласно наставления по применению.

 

10. ДЕЗИНФЕКЦИЯ, ДЕЗИНСЕКЦИЯ, ДЕРАТИЗАЦИЯ

ДЕЗИНФЕКЦИЯ включает в себя мероприятия, на­правленные на уничтожение возбудителей инфекционных болезней на объ­ектах внешней среды, что способствует предотвращению передачи возбуди­телей восприимчивым здоровым животным.

Дезинфекцию с учетом ее ветеринарно-санитарного и эпизоотологического значения делят на профилактическую, вынужденную и заключительную.

Профилактическая дезинфекция направлена на предупреждение на­копления возбудителей инфекционных болезней и снижение общей мик­робной загрязненности. На нутриеводческих фермах профи­лактическая дезинфекция является элементом общего производственного процесса и проводится по плану, составленному с учетом особенностей тех­нологии производства. В плане предусматривают сроки проведения, методы и режимы дезинфекции производственных и подсобных помещений, инвен­таря, оборудования, спецодежды и прочих объектов, а также потребность в дезинфицирующих средствах. Профилактическую дезинфекцию, как в государственных, так и в ин­дивидуальных хозяйствах проводят в следующие сроки: наружные клетки, закрытые помещения - один раз в год; маточные клетки - за две неде­ли перед щенением и непосредственно после отсадки молодняка; клетки, предназначенные для рассадки отъемного молодняка - после их освобож­дения; места содержания молодняка - после снятия его с откорма или от­правки на племенные цели; карантинные помещения - после вывода из них нутрий; все клетки - непосредственно после их освобождения в связи с производственной необходимостью (пересадкой, выбраковкой, вынужден­ным убоем нутрий).

Вынужденная дезинфекция проводится при возникновении инфек­ционных болезней в целях предотвращения распространения возбудителя инфекции за пределы эпизоотического очага и внутри него. Вынужденную дезинфекцию помещений проводят сразу же после выявления и изоляции животного, больного инфекционной болезнью. В дальнейшем проводят те­кущую дезинфекцию с целью снижения уровня зараженности объектов внешней среды патогенными микроорганизмами и уменьшения опасности перезаражения животных внутри хозяйства. Периодичность проведения те­кущей дезинфекции зависит от характера болезни, эпизоотической ситуа­ции, специфики технологии производства, природно-климатических усло­вий и других факторов.

Заключительную дезинфекцию проводят перед снятием карантина или огра­ничений после ликвидации вспышки инфекционной болезни в хозяйстве. Целью заключительной дезинфекции является полное уничтожение возбуди­телей инфекционных болезней на объектах внешней среды. Дезинфекция со­стоит из двух последовательно проводимых операций: тщательной механи­ческой очистки и собственно дезинфекции.

Механическая очистка - важнейший процесс в дезинфекционных меро­приятиях. От ее качества зависит эффективность дезинфицирующих средств. Перед проведением механической очистки помещение орошают слабым дез­инфицирующим раствором (при вынужденной дезинфекции) или водой (при профилактической дезинфекции) для предотвращения рассеивания возбудителя. Тщательная механическая очистка - это такая степень очистки, при которой отчетливо видны характер поверхности и цвет ее материала и визуально не обнаруживаются крупные комочки навоза, корма или других механических загрязнений даже в самых труднодоступных местах.

В зависимости от характера инфекционной болезни мусор, навоз вывозят для био­термического обеззараживания или сжигают, а если это невозможно сделать, то закапывают в специально вырытые траншеи. В нутриеводческих хо­зяйствах для увлажнения помещений и оборудования кормокухонь (при их очистке) применяют 0,5%-ные растворы дезмола или моющего порошка А, а окончательную очистку проводят струёй горячей воды (60-70°С) под давле­нием. Надо отметить, что механическую очистку и дезинфекцию клеток и помещений проводят после освобождения их от животных.

Для дезинфекции объектов животноводства используют физические, химические и биологические средства и методы, физические методы дезин­фекции включают: солнечный свет (прямые лучи и отчасти рассеянный свет) оказывает губительное действие на многие виды патогенных микробов. Ультрафиолетовое облучение (ртутно-кварцевая, ультрафиолетовые лампы) оказывает очень сильное бактерицидное действие. Высушивание также губительно действует на многие виды микро­организмов. Систематическое проветривание помещений способствует под­держанию сухости и оказывает определенный обеззараживающий эффект. Часто используют для дезинфекции кожевенного сырья.

Высокая температура для целей дезинфекции используется очень часто. Сжигают трупы животных, инфицированные остатки корма, навоз, мало­ценные предметы.

Обжиганием (до побурения) обеззараживают деревянные предметы. Металлические предметы, в том числе клетки для нутрий, обжигают обычной паяльной лампой, при этом обращая внимание на углы и щели. Хорошие результаты дает предварительное увлажнение клеток водой, которая, быстро испаряясь, образует в углублениях и трещинах горячий пар, действующий губительно на микроорганизмы.

Сухой жар (горячий воздух), водяной пар также нередко используют для обеззараживания.

Кипячением в 1%-ном растворе соды обеззараживают одежду, белье, различные металлические и деревянные предметы. Кипячение в течение 1-3 часов (в зависимости от вида возбудителя болезни) надежно уничтожает патогенные микроорганизмы.

  К химическим средствам относятся группы химических веществ из щелочей, кислот, окислителей, фенолов, галоидов, формальдегидов, солей тяжелых металлов и их производных. Химические средства наиболее доступны и широко применяются в практике для обработки помещений, почвы, оборудования. Их чаще всего используют в виде водных растворов и аэрозолей, реже – в виде сыпучих веществ. На нутриеводческих фермах чаще всего используют следующие дезинфицирующие вещества: щелочи (едкий натр, кальцинированная сода, демп), кислоты (молочная, надуксусная, муравьиная, дезоксон, уксусная и др.), окислители (сухая хлорная известь, осветленный раствор хлорной извести, гипохлориты, хлорамин, однохлористый йод и др.), формальдегиды (формалин, параформ, парасод, фоспар). Промышленность выпускает 34-40%-ный раствор формальдегида – формалин, который помимо формальдегида содержит метиловый спирт (до 15%) и около 50% воды. Для дезинфекции чаще используют 2-5%-ные растворы формалина. Бактерицидность раствора формалина значительно повышается после добавления к нему едкого натра. Реже применяют креолин и ксилонафт. Выбор и концентрация дезинфицирующих средств зависит от характера возбудителя инфекционной болезни и вида инфекции. Обычно на 1 м² обрабатываемой площади применяют 1 л раствора. Применяют также теотропин – новое дезосредство. В животноводческих помещениях для профилактической, текущей и заключительной дезинфекции 1,0 – 5%-ные растворы, в зависимости от устойчивости микроорганизмов. Норма расхода 0,3 – 1,0 л/м², экспозиция 18-20 часов.

Для уничтожения патогенных микроорганизмов во внешней среде используются и биологические средства (микробы - антагонисты, термо­фильные микробы и др.). Таким примером является биотермический спо­соб обеззараживания навоза. Бактерицидным действием обладают фитонциды и летучие вещества многих растений: чеснока, лука, алоэ, листьев березы, черемухи, черной смородины, можжевельника и др.

Одним из способов применения дезинфицирующих растворов явля­ется влажная дезинфекция, которая может осуществляться погружением предметов в раствор, мытьем и опрыскиванием.

Погружением в дезинфицирующие растворы обеззараживают щетки, ведра и другие предметы, которые до погружения надо вымыть в растворе соды. Опрыскивание - наиболее частый способ дезинфекции. Для оп­рыскивания применяют гидропульты различных систем, ручные опрыс­киватели и дезинфекционные установки. В приусадебных хозяйствах можно пользоваться обычным веником.

Аэрозольная дезинфекция. В последнее время широкое распрост­ранение получил метод дезинфекции помещений химическими препаратами, переведенными в аэрозольное состояние с помощью специальных генерато­ров. Мельчайшие капли аэрозоля дезинфицирующего средства, распростра­няясь по помещению, проникают в щели, пазы, трещины и другие труднодо­ступные места. Использование аэрозолей позволяет одновременно дезинфи­цировать поверхности помещения, оборудование, находящееся в нем, и воз­дух. Для дезинфекции применяют 2 - 4%-ный горячий раствор едкого натра, раствор гипохлорита с содержанием 2% активного хлора, 2%-ный раствор формальдегида, 3%-ный раствор парасода, 3%-ный раствор фоспара, 6%-ный раствор демпа. После дезинфекции (влажной или аэрозольной) и необходимой выдержки помещение проветривают, доступные для животных участки поверхностей обмывают водой, освобождают от остатков дезинфицирующего раствора кормушки и поилки. Животных вводят в помещение после исчезновения запаха применяемого дезсредства. Аэрозольную дезинфекцию можно проводить в присутствии нутрий, используя безвредные дезинфектанты: молочную кислоту из расчета20 мл на 1 м³ , перекись водорода-15 мл на 1 м³.

ДЕЗИНСЕКЦИЯ - мероприятие, направленное на уничтожение вредных членистоногих переносчиков возбудителей инфекционных болезней (слепни, комары, москиты, мухи, клещи).

Дезинсекцию проводят одновременно с профилактической дезинфекцией или же непосредственно после нее с учетом совместимости препаратов, возможно также после механической очистки помещений и территории фермы от навоза и мусора. Помимо непосредственно дезинсекции необходимо проводить и общие санитарные мероприятия: постоянно поддерживать чистоту помещений и территории, необходимо тщательно убирать навоз из помещений, не допуская загрязнения прифермской территории, своевременно очищать и дезинфицировать выгребные ямы и места свалки мусора.

В кролиководческих хозяйствах с целью дезинсекции помещения обрабатывают водными растворами и эмульсиями 0,5 %-ного хлорофоса, 0,5%-ного трихлорметафоса, 1%-ного карбофоса, 0,1%-ного диметилдихлорвинилфосфата (ДДВФ), 0,2-0,5%-ного метатиона, диазонина, дифоса (абата), циодрина и др. Препараты готовят из расчета 50-100 мл на 1 м² обрабатываемой площади. Для дезинсекции наружных поверхностей - из расчета 100-200 мл на 1 м². Для уничтожения мух на территории фермы рекомендуют жижеприемники, и выгребные ямы засыпать сверху сухой хлорной известью из расче­та 1 кг на 1 м² через каждые пять дней. В помещениях можно использовать липкую бумагу или приманки, отравленные хлорофосом (0,1%) с добавкой 2 - 5% сахара, мелассы, обрата.

  ДЕРАТИЗАЦИЯ - это мероприятие, направленное на истребление вредных грызунов - носителей и распространителей возбудителей инфекции. Профилактические меры заключаются в создании условий, пре­пятствующих доступу грызунов к кормам, а также в лишении их убежищ, где они могли бы размножаться. Для этого необходимо: своевременно уби­рать навоз и остатки корма из помещений и с территории ферм; хранить концентрированные корма в помещениях и емкостях, недоступных для мы­шей и крыс; постоянно следить за состоянием полов, стен, дверей и свое­временно ремонтировать их. Истребительные меры осуществляют различными методами: меха­ническим, химическим и биологическим. Механический способ сводится к отлову грызунов различными ло­вушками, капканами, давилками с пищевыми приманками.

Химический метод применяют весьма широко. В качестве ядов наи­более часто используют средства, обладающие антикоагулянтным действи­ем: зоокумарин, натриевая соль зоокумарина, пенокумарин, дифенацин и этилфенацин. Для приготовления приманок используют хлеб, разные ка­ши, комбикорм, мясной и рыбный фарш и т. п., в которые добавляют 2 -5% препарата. Приманки применяют свежими ежедневно. В течение 4-5 дней подряд. Их раскладывают в норы грызунов и в другие места, недоступные для домашних животных и птиц. Некоторые из этих ядов можно применять в жидком виде или пены (пенокумарин), а также в виде ядови­тых липких масс. Из других ядов используют фентолацин, крысид, фосфид цинка, аминостигмин и др. В обращении с приманками необходима осто­рожность.

  Биологический метод заключается в использовании естественных врагов грызунов (кошек, собак, ежей и т. п.) или в искусственном заражении грызунов микробами, вызывающими их массовое заболевание и гибель. Наиболее удобным и эффективным является комбинированный пре­парат - бактокумарин, в состав которого входят бактериальная культура, выращенная на зерне, и натриевая соль зоокумарина. Кроме того, используют бесприманочные методы - прямое опыление нор и ходов грызунов порошкообразными ядами или приготовление мазеоб­разных ядовитых гелей на жировой основе, которыми обмазывают норы, пу­ти проходов грызунов и места их обитания. Грызуны пачкаются ядовитыми мазями, слизывают жир с ядом и гибнут в течение 3-4 дней.

 

11. МЕРОПРИЯТИЯ ПО ПРОФИЛАКТИКЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ

11.1. Профилактика колибактериоза, как и смешанной кишечной инфекции, протекающей с участием эшерихий, основывается на проведении комплекса технологических, зоогигиенических, ветеринарно-санитарных и специфических мероприятий, направленных на повышение резистентности организма матери и новорожденного молодняка, снижения уровня контаминации помещений репродукторного отделения фермы возбудителями болезни и предотвращения заражения животных в период их рождения и выращивания патогенными микроорганизмами через корма, объекты внешней среды. При этом исходят из особенностей содержания и выращивания молодняка, присущих каждому виду животных.

   С целью предупреждения возникновения колибактериоза у новорожденных животных проводят вакцинацию маточного поголовья и молодняка соответствующими вакцинами в сроки и дозах, указанных в наставлениях по их применению. Наряду с вакцинами применяют следующие препараты:

а) иммуномодуляторы (поливедрин, вестин, левамизол, полиоксидонин, Т- и В-активин и др.), которые вводят одновременно с вакциной одно- или двукратно согласно наставлению по их применению;

б) поливалентную гипериммунную колисыворотку, а также колифаг в соответствии с действующими наставлениями по их применению;

в) нормальные глобулины сывороток крови животных, препарат вводят внутримышечно или подкожно по 0,7 мл на 1 кг массы тела один раз в сутки в течение 2-3 дней;

г) пробиотики (ветом - 1.1. споробактерин, субалин, ромакол, бифидумбактерин, бифацидобактерин, лактицин и др.), которые  применяют в профилактической дозе по схеме, указанной в наставлении.

11.1. Для предупреждения заболевания колибактериозом нутрий руководители, специалисты, рабочие хозяйств (ферм), предприятий по приемке, транспортировке и переработке нутрий и сырья, заготовительные конторы, склады, граждане-владельцы нутрий обязаны строго выполнять утвержденные ветеринарно-санитарные правила для нутриеводческих ферм.

11.2. Ветеринарные специалисты нутриеводческих хозяйств (ферм), кооперативных организаций, обществ нутриеводов-любителей, а также учреждений госветсети обязаны:

11.3. Обеспечить систематическое наблюдение за состоянием нутрий в зоне обслуживания.

11.4. Проводить плановые профилактические прививки против колибактериоза, обратив внимание на иммунизацию нутрий, содержащихся вокруг заготовительных контор, складов, баз и холодильников мехсырья, перерабатывающих предприятий.

 

  12. МЕРОПРИЯТИЯ ПО ЛИКВИДАЦИИ ЗАБОЛЕВАНИЯ

12.1. По установлению диагноза на колибактериоз администрация района (города) в порядке, предусмотренном Ветеринарным уставом Российской Федерации, по представлению главного ветеринарного врача района (города) выносит решение об объявлении хозяйства (фермы), населенного пункта (его отдельной самостоятельной части в зависимости от эпизоотической обстановки) неблагополучными по колибактериозу и установлении ограничений. В решении указывают точные границы эпизоотического очага болезни, неблагополучного пункта, угрожаемой зоны, а также определяют основные мероприятия по ликвидации болезни в неблагополучном пункте и ее профилактике в угрожаемой зоне.

12.2. По условиям ограничений в неблагополучном пункте запрещают:

12.2.1. Ввоз и вывоз нутрий, продуктов их убоя, шкурок, инвентаря и кормов.

12.2.2. Перегруппировку нутрий.

12.2.3. Организацию выставок и других мероприятий, связанных со скоплением нутрий.

12.2.4. Торговлю нутриями, продуктами их убоя, шкурками.

12.2.5. Обмен животными между нутриеводами.

12.2.6. Заготовку и скармливание нутриям травы и сена из мест, где могли находиться больные или имелись трупы этих животных.

12.3. В неблагополучном хозяйстве (пункте) проводят:

12.3.1. Точный учет всего поголовья нутрий.

12.3.2. Применяют специфическую сыворотку против колибактериоза, согласно наставления по применению, а затем через 10-14 дней проводят вакцинацию этого поголовья.

12.3.3. Проводят тщательную механическую очистку и дезинфекцию нутриеводческих ферм, выгульных дворов, оборудования, а также помещений, где содержались животные у граждан-владельцев нутрий по п.10.

12.3.4. Шкурки от кроликов из неблагополучных пунктов (хозяйств) дезинфицируют в процессе их технологической обработки на перерабатывающем предприятии согласно действующей инструкции по дезинфекции шкурок.

 

13. МЕРОПРИЯТИЯ В ЗОНЕ, УГРОЖАЕМОЙ ПО ЗАНОСУ ВОЗБУДИТЕЛЯ

 13.1. В угрожаемую зону входит территория с населенными пунктами и хозяйствами, непосредственно прилегающие к неблагополучному по колибактериорзу пункту, а также хозяйства, которые в течение последнего месяца имели производственные связи с неблагополучным пунктом по ввозу нутрий, кормов для них или другие хозяйственные связи.

13.2. В угрожаемой зоне проводят следующие ограничительные, ветеринарно-санитарные и хозяйственные мероприятия:

 13.2.1. Все восприимчивое поголовье нутрий в государственных и частных хозяйствах вакцинируют против колибактериоза.

13.2.2. Ограничивают хозяйственные связи с неблагополучными по колибактериозу хозяйствами и населенными пунктами. 

13.2.3. Устанавливают строгий ветеринарно-санитарный режим за содержанием и кормлением нутрий.

13.2.4. Закрепляют постоянных лиц и транспорт для обслуживания нутриеводческой фермы.

13.2.5. Запрещают ввоз и вывоз нутрий из угрожаемой зоны, торговлю на рынках нутриями, мясом.

13.2.6. Оповещают население об угрозе распространения болезни и установленных, в связи с этим, ограничениями.

13.2.7. Усиливают ветеринарно-санитарный надзор на рынках, мясокомбинатах, предприятиях, заготавливающих и перерабатывающих продукты и сырье, полученное от убоя нутрий.

13.2.8. Проводят массово-разъяснительную работу среди населения по недопущению распространения колибактериоза.

 

14. СНЯТИЕ ОГРАНИЧЕНИЙ

14.1. Хозяйство (пункт) объявляют благополучным через 15 дней после проведения в нем вакцинации нутрий и заключительных ветеринарно-санитарных мероприятий.

14.2. Ввоз нутрий в бывший неблагополучный пункт и угрожаемую зону допускается после их вакцинации против колибактериоза в хозяйствах-поставщиках, которые обязаны сделать об этом соответствующую запись в ветеринарном документе.      

 

                 Литература

1. Белая О.Ф., Черкасов В.Л., Белая Ю.А. и др. Реакция коагглютинации при кишечных инфекционных заболеваниях.//Методические рекомен­дации. М., 1990.

2. Белоусов В.И., Каврук Л.С, Малахов Ю.А. и др. Методические указания по бактериологической диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных. М., 2000.

3. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии. Костенко Т.С., Родионова В.Б, Скородумов Д.И. М.: Колос, 2001.

4. Клиническая иммунология: Учебник /Под ред. А.В. Караулова. – М.: МИА, 1999.

5. Сидоров М.А, Скородумов Д.И, Федотов В.Б. Определитель зоопатогенных микроорганизмов. – М.: Колос, 1995.

6. Скородумов Д.И, В.В. Субботин, Сидоров М.А, Костенко Т.С. Микробиологическая диагностика бактериальных болезней животных. – М.:ИзографЪ, 2005.

7. Скала Л.З., Сидоренко С.В., Нехорошева А.Г., Лукин И.Н., Грудинина С.А. Практические аспекты современной клинической микробиологии.

 – М.: Триада, 2004.