Определение осмотической резистентности эритроцитов

Степень устойчивости эритроцитов в гипотоническом растворе оценивается как их осмотическая резистентность (устойчивость). Различают минимальную и максимальную границы осмотической резистентности. Для здоровых людей минимальная граница соответствует раствору, содержащему 0,42 — 0,48 % NaCl, полный же гемолиз (максимальная граница) происходит при концентрации 0,30—0,34 % NaCl.

Причины гемолиза. Гемолиз может быть вызван химическими агентами (хлороформ, эфир, сапонин и др.), разрушающими мембрану эритроцитов. В клинике нередко встречается гемолиз при отравлении уксусной кислотой. Гемолизирующими свойствами обладают яды некоторых змей {биологический гемолиз).

При сильном встряхивании ампулы с кровью также наблюдается разрушение мембраны эритроцитов — механический гемолиз. Механический гемолиз иногда возникает при длительной ходьбе из-за травмирования эритроцитов в капиллярах стоп.

Если эритроциты заморозить, а потом отогреть, то возникает термический гемолиз. Наконец, при переливании несовместимой крови и наличии аутоантител к эритроцитам развивается иммунный гемолиз. Последний является причиной возникновения анемий и нередко сопровождается выделением гемоглобина и его производных с мочой (гемоглобинурия).

7. Лейкоциты: виды, количество, методики подсчета

Прибор дифференцированного подсчёта лейкоцитов

1. Какие рисунки соответствуют форменным элементам крови?

1.1. Базофил

1.2. Лимфоцит

1.3. Малый лимфоцит

1.4. Моноцит

1.5. Нейтрофил

1.6. Тромбоцит

1.7. Эозинофил

1.8. Эритроцит

2. Как называются показанные на рисунке квадраты камеры Горяева?

В последнее время получили распространение приборы, позволяющие одновременно анализировать до 18 параметров крови, в том числе и количество лейкоцитов, процент гранулоцитов, лимфоцитов и моноцитов, а также их абсолютное количество в 1 мм³, количество тромбоцитов в 1 мм³, средний объем тромбоцита, ширину распределения тромбоцита по объему и тромбокрит (доля объема цельной крови, занимаемой тромбоцитами).

Дифференцированный подсчет перечисленных групп лейкоцитов основан на том, что специальный лизирующий реагент разрушает эритроциты и сжимает лейкоциты. Особенно сильно сжимается цитоплазма лимфоцитов, в меньшей степени гранулоцитов и еще в меньшей — моноцитов, что отражается на их сопротивлении и регистрируется счетчиком.

Используют автоматизированные счетчики лейкоцитарной формулы. Существует два типа автоматов:

1. системы компьютерного анализа клеточного изображения;

2. проточные системы, идентифицирующие различные формы лейкоцитов по размерам клетки и особенностям окрашивания.

Однако они не способны полностью заменить визуального анализа мазка крови, ибо не существует аппаратов, способных надежно идентифицировать все незрелые или патологические клетки.

Современные методы определения концентрации гемоглобина основаны на способности этого протеина интенсивно окрашиваться. В качестве надежного способа измерения применяется цианметгемоглобиновый метод, в основе которого лежит переход всех известных соединений гемоглобина в устойчивое производное — циангемоглобин. Концентрация гемоглобин-цианида определяется на спектрофотометре при длине волны 540 нм и сравнивается с известным стандартом.

Определение различных органических ингредиентов плазмы производится или фотометрическим, или иммуноферментным методом, с использованием меченых антител или антигенов. Концентрация отдельных ингредиентов определяется по интенсивности окраски и сравнивается с имеющимся эталоном.

Состояние сосудисто-тромбоцитарного гемостаза оценивают по времени кровотечения при проколе пальца или мочки уха с регистрацией капли крови на фильтровальной бумаге. Для оценки сосудисто-тромбоцитарного гемостаза внедряют аппаратные методы. Чаще используют фильтрометр, в котором регистрируется скорость блокады микрофильтра агрегатами тромбоцитов при стандартизируемом пропускании через него исследуемой крови.

Исследование агрегации тромбоцитов осуществляют с помощью приборов агрегометров. Принцип их работы основан на фотометрической регистрации процесса агрегации по падению оптической плотности плазмы. Применяют различные типы агрегометров, соединенных для обработки полученных данных с компьютером, а для записи — с принтером. Существует стандартный набор агрегирующих агентов (АДФ, коллаген, адреналин, тромбин и другие), с помощью которых активируются тромбоциты и запускается процесс агрегации. В последние годы нашли применение аг-регометры, основанные на кондуктометрических принципах склеивания тромбоцитов между собой и пригодные для исследования цельной крови.

[V.G.1]переработать