Исследование микробов, содержащихся в исследуемом материале в высокой концентрации

Готовят ряд стерильных пробирок с изотоническим раствором хлорида натрия для приготовления разведений исследуемого материала (рис. 4.1).

Рис. 4.1. Схема приготовления разведений при проведении метода количественного посева исследуемого материала

Последовательное разведение исследуемого материала приводит к снижению концентрации бактерий. При посеве на питательную среду в одинаковом объеме (0,05 мл, например) содержимого каждой пробирки с разведенным исследуемым материалом есть возможность подсчета числа колоний (рис.4.2).

Рис.4.2. Результаты количественного посева для определения содержания КОЕ в исследуемом материале

Каждая колония - это потомство одной бактериальной клетки, поэтому число колоний равняется числу бактериальных клеток в исследуемой пробе, или числу колониеобразующих единиц - КОЕ. Для определения количества бактерий в единице объема исследуемого материала остается число колоний умножить на фактор разведения исследуемого материала:

КОЕ = 10 ´ 10⁶´ 20 = 2 ´ 10⁸ / мл,

где 10 - число колоний, 10⁶ - концентрация микробов в третьем разведении, 20 - часть от 1 мл, составляющая 0,05 мл, т.е. посевную дозу в данном примере.